 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 3232 | 回復: 14 | |||
[求助]
請教用過反相硅膠柱分離的高手
|
|||
|
我這個東西是正丁醇部分提取的東西，之前他們用大孔砍斷效果不好，到我這的時候就上LH-20試了下，效果不錯，但是那個上樣量太少了160g填料一次上樣不到2g，現在老師讓我換用反相，所以想請教哈有過使用經驗的同仁們。 1.實驗室的填料都是前兩屆的師兄師姐用過的裝在一些小柱子里的，有幾根都已經干了，這個會不會影響使用，怎么處理？而且，還有點臟，用甲醇反復洗嗎？ 2.填料和上樣量的比大概是多少，我這個有個麻煩的是填料都濕的了，質量還不好計算。如果這樣可不可以按柱體積來 3.樣品上樣如何選擇是濕法還是干法上樣 有點羅嗦有點雜，謝謝大家了 |
回復此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 一些網址 |
» 猜你喜歡
304求調劑
已經有6人回復
-
材料工程專碩調劑
已經有6人回復
-
一志愿天大材料與化工（085600）總分338
已經有4人回復
-
085700資源與環(huán)境308求調劑
已經有3人回復
-
求材料調劑
已經有8人回復
-
294求調劑材料與化工專碩
已經有5人回復
-
一志愿華中科技大學，080502，354分求調劑
已經有4人回復
-
一志愿吉林大學材料學碩321求調劑
已經有6人回復
-
085410人工智能專碩317求調劑（0854都可以）
已經有3人回復
-
330求調劑
已經有3人回復
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 正丁醇部分上反相硅膠柱條件摸索
已經有6人回復
- 反相硅膠硅膠怎樣清洗
已經有7人回復
- 求助：反相硅膠
已經有10人回復
- 【求助】ODS反相硅膠柱分離苯乙醇苷類物質怎么分��？
已經有10人回復
- 【求助】求助反相硅膠柱上樣前樣品預處理
已經有8人回復
- 【求助】準備用反相硅膠柱層析分離純化，之前用HPLC怎么摸條件��？
已經有7人回復
- 【求助】反相硅膠分離純化皂甙的方法
已經有8人回復
- 【求助】在什么情況下使用反相硅膠柱子
已經有20人回復
- 【請教】哪位蟲友用過C18的反相硅膠板，如何反復使用？(求助結束，望返還金幣)
已經有9人回復
【答案】應助回帖
★ ★ ★
長白山的夢: 金幣+3, ★★★很有幫助, 很是受用 2012-06-24 09:46:42
長白山的夢: 金幣+3, ★★★很有幫助, 很是受用 2012-06-24 09:46:42
|
買填料的技術老師告訴我 1. 一般情況下的常規(guī)清洗可以使用100%甲醇，100%丙酮。 2. 長時間柱內正常有機物污染，可用75%丙酮：25%異丙醇，或100%異丙醇。 3. 頑固有機污染物污染時可以使用100%乙酸乙酯，100%正己烷。4.使用正己烷或乙酸乙酯前要用異丙醇沖洗柱子保持溶劑相溶。 5.一般情況下要沖洗10個以上的柱體積，沖洗過程中要注意柱子的壓力，壓力過高時降低流速進行清洗。 還有可以用 tris 洗，但是具體濃度什么的我忘了，我試過tris和丙酮，感覺作用不大。其實有點污染也沒事，你要是實在怕污染你的樣品的話可以梯度洗幾個體積，然后把液體旋干 看看有沒有質量。。。我看到網上有人這么做。。。 乙腈我挺少用的。只是在做液相的時候用，看你這么一說感覺你比我愛惜自己多多了。哈哈~ 談不上請教啦，都是互相交流下，想當初我剛做的時候也好多不懂，現在也是。。都是在不斷的學習吧 |
10樓2012-06-21 20:18:48
rose.no.9
木蟲 (著名寫手)
- 應助: 10 (幼兒園)
- 金幣: 8533.2
- 散金: 803
- 紅花: 2
- 帖子: 1046
- 在線: 168.2小時
- 蟲號: 830157
- 注冊: 2009-08-18
- 專業(yè): 天然有機化學
2樓2012-06-20 16:45:41
【答案】應助回帖
★ ★
感謝參與，應助指數 +1
長白山的夢: 金幣+2, ★有幫助 2012-06-21 09:48:01
感謝參與，應助指數 +1
長白山的夢: 金幣+2, ★有幫助 2012-06-21 09:48:01
|
反相硅膠也叫ODS，用甲醇裝柱子，用甲醇-水做洗脫劑，開始用低濟度的甲醇，慢慢加大甲醇的量，最后用甲醇沖柱子，用甲醇保存就可以了 還可以用：1，推薦你使用HPLC試試。也是選用反向硅膠柱，流動相為乙腈-水或者是甲醇-水。這樣的分離效果和分離效率肯定比你自己裝柱子要高很多倍！而且你的樣品是黃酮類的天然產物，那么它的或是它這一類的化合物的HPLC分離條件文獻中可定有大量記載，你也有參考依據了！自己裝的反相硅膠柱酯適合于分離極性差別明顯的兩種或三種等樣品的分離，如果要分離物的種類很多的話，是沒有明顯效果。 2， 推薦你使用正相硅膠柱層析方法試試。原理和反向類似，只是出峰順序相反。個人覺得對你這種要分離的天然產物，正相硅膠柱層析較反向更有優(yōu)勢。而且天然產物的這種分離條件文獻中也要大量記載，你可以在參考的基礎上進行優(yōu)化。 1關于你說的反相硅膠柱用的應該不是中壓色譜系統(tǒng)而是就用了個泵在跑，那么就沒有紫外檢測，可以選擇跑柱同時點板檢測，所以先判斷你樣品有沒有顏色，如果有，在有顏色時接的瓶多一些。 2關于洗脫劑和梯度建議參考文獻 3上樣量一般比較純的話上樣量不大于 0.5g/120g 填料 |
3樓2012-06-20 17:13:26
【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應助指數 +1
長白山的夢: 金幣+12, ★★★★★最佳答案, 謝謝 2012-06-21 09:47:21
感謝參與，應助指數 +1
長白山的夢: 金幣+12, ★★★★★最佳答案, 謝謝 2012-06-21 09:47:21
|
1.實驗室的填料都是前兩屆的師兄師姐用過的裝在一些小柱子里的，有幾根都已經干了，這個會不會影響使用，怎么處理？而且，還有點臟，用甲醇反復洗嗎？ 臟的把柱頭挖了吧��！挖出來的用來拌樣挺好。干了的多用甲醇沖沖。。也可以梯度沖，說不定能把臟東西沖出來，但是梯度不要跨太大。 2.填料和上樣量的比大概是多少，我這個有個麻煩的是填料都濕的了，質量還不好計算。如果這樣可不可以按柱體積來 我25g ods最多上過600~800mg吧 3.樣品上樣如何選擇是濕法還是干法上樣 能用初始流動相最好了。。。用水更好，反正最好少加甲醇，有一次我用50%甲醇溶樣， 30%甲醇起始濃度，結果樣品一下子全部泄露了。。悲劇~ 但這和你樣品的性質也有關系，某些樣品，如黃酮苷吧，我感覺50um的ods對其吸附能力就比較弱。。。。 實在水難容的就用臟的ods拌樣，舍不得的話就用硅藻土拌樣，硅藻土是別人教的，，，但是如果是加壓的話，記得中間一定要加個篩板，別吧硅藻土沖到柱子里了。。 也可以上面接一個超級小柱子，專門裝拌好的硅藻土和樣品，我就是這么干的。 |
4樓2012-06-20 21:56:03
mlanqiang
木蟲之王 (文學泰斗)
藍博士
- 應助: 3409 (副教授)
- 金幣: 55278.8
- 散金: 5498
- 紅花: 62
- 帖子: 73916
- 在線: 730.8小時
- 蟲號: 302202
- 注冊: 2006-12-02
- 性別: GG
- 專業(yè): 膠體與界面化學
5樓2012-06-20 22:34:28
6樓2012-06-21 09:14:36
hinge1001
銀蟲 (小有名氣)
- 應助: 17 (小學生)
- 金幣: 331.5
- 散金: 10
- 帖子: 253
- 在線: 183.1小時
- 蟲號: 1823881
- 注冊: 2012-05-18
- 性別: GG
- 專業(yè): 色譜分析
7樓2012-06-21 09:24:03
8樓2012-06-21 09:44:03
9樓2012-06-21 09:56:12
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 長白山的夢 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研]
 271材料工程求調劑
+4
|
.6lL 2026-03-18 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[教師之家] 焦慮 +8 | 水冰月月野兔 2026-03-13 | 12/600 |
|
|
[考研] 311求調劑 +6 | 26研0 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703化學調劑 +4 | pupcoco 2026-03-17 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 268求調劑 +6 | 簡單點0 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料與化工求調劑 +6 | 為學666 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 326求調劑 +5 | 上岸的小葡 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 材料專碩326求調劑 +6 | 墨煜姒莘 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[論文投稿] 有沒有大佬發(fā)小論文能帶我個二作 +3 | 增銳漏人 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 326求調劑 +4 | 諾貝爾化學獎覬?/a> 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[基金申請]
今年的國基金是打分制嗎？
 50+3
|
zhanghaozhu 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703化學調劑 290分有科研經歷，論文在投 +7 | 膩膩gk 2026-03-14 | 7/350 |
|
|
|
[考博] 東華理工大學化材專業(yè)26屆碩士博士申請 +6 | zlingli 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0856專碩279求調劑 +5 | 加油加油！? 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿哈工大材料324分求調劑 +5 | 閆旭東 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 330求調劑 +3 | ?醬給調劑跪了 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 304求調劑 +7 | 7712b 2026-03-13 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 281求調劑 +9 | Koxui 2026-03-12 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 277求調劑 +4 | anchor17 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0817化學工程與技術考研312分調劑 +3 | T123 tt 2026-03-12 | 3/150 |
|