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lfbapple木蟲 (小有名氣)
蘋果林
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[求助]
請問使用NHS和EDC做羧基和氨基反應(yīng)需要注意哪些條件?
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各位蟲友: 小弟要做氨基和羧基的歐聯(lián),文獻(xiàn)上說使用NHS和EDC,但是不知道還需要注意什么?望不吝賜教。 |
木蟲 (小有名氣)
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由于EDC很容易水解,EDC和NHS要過量,以保證反應(yīng);最好是分兩步進(jìn)行,即先做羧基活化,再加胺基進(jìn)去反應(yīng);活化要在pH4.5-5.0緩沖里進(jìn)行,緩沖要避免胺基和羧基的存在,我們一般會(huì)用0.1M的MES緩沖;與胺基的反應(yīng)在酸性堿性都可以,但是有點(diǎn)矛盾,NHS在酸性條件下穩(wěn)定性高,但反應(yīng)會(huì)慢,在堿性條件下反應(yīng)會(huì)快,但NHS不穩(wěn)定。 若用一步法,就在緩沖里把東西都加進(jìn)去就行了。 |
木蟲 (著名寫手)
道圣

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