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[交流] 如果想重復(fù)利用提取植物樣品DNA的小塑料研磨棒，如何去除DNA？

轉(zhuǎn)基因植物鑒定需提取微量的DNA，植物微量提取DNA用到小的塑料研磨棒，如果想重復(fù)利用，為防止污染，如何完全去除DNA?我們是水清洗加酒精清洗，但清洗很難保證完全去除，濕熱滅菌好像只能使其變性，使用酶用量多又太貴。大家去除DNA都有什么高招呀？

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1樓 2011-11-22 23:13:59

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zgb1982

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西瓜(金幣+1): 鼓勵(lì)交流 2011-11-23 21:03:39

我們實(shí)驗(yàn)室用這些，一般清水洗了，干了就能用了或者濕滅一下。不過(guò)目前大家都開(kāi)始用機(jī)器提取了。

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2樓2011-11-23 11:39:59

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西瓜(金幣+3): Good！不過(guò)用到DEPC就麻煩好多了…… 2011-11-23 21:04:25

氫氧化鈉泡一會(huì)，讓DNA變性并且?guī)献銐虻呢?fù)電。同時(shí)RNA會(huì)降解。然后TBE緩沖液中跑2個(gè)小時(shí)電泳。DNA就會(huì)離開(kāi)研磨棒。再用DEPC水沖洗。

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3樓2011-11-23 12:28:16

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我們有大量的轉(zhuǎn)基因苗要鑒定，小塑料棒清水洗了干了再用存在風(fēng)險(xiǎn)，很有可能會(huì)出現(xiàn)弱的目的條帶，形成交叉污染。我們有機(jī)器提取血液DNA的，但沒(méi)有試過(guò)提取植物的，可能是因?yàn)闃由�，需要液氮研磨，機(jī)器也不理想。

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4樓2011-11-23 12:34:04

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3樓: Originally posted by qingyuansw20 at 2011-11-23 12:28:16:
氫氧化鈉泡一會(huì)，讓DNA變性并且?guī)献銐虻呢?fù)電。同時(shí)RNA會(huì)降解。然后TBE緩沖液中跑2個(gè)小時(shí)電泳。DNA就會(huì)離開(kāi)研磨棒。再用DEPC水沖洗。

謝謝你的方法是比較徹底但太復(fù)雜了一次性使用相對(duì)這么處理還更劃算了

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5樓2011-11-23 12:38:03

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mhb828

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如果你的研磨棒不是塑料的就好了，我的是陶瓷的，我用酒精燒，很方便也很徹底

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6樓2011-11-23 15:58:58

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dmtxbb

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西瓜: 塑料的啊…… 2011-11-23 21:05:05

我覺(jué)得洗洗然后沖沖后，用酒精燈稍微烤會(huì)，注意別化了，就可以吧，都變性了

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7樓2011-11-23 16:09:37

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vcvcvc

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西瓜(金幣+1): 鼓勵(lì)交流 2011-11-23 21:05:27

1% SDS 泡過(guò)夜，酒精梯度洗到水里，濕滅。

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8樓2011-11-23 16:12:54

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xiaohaozi9876

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那些本來(lái)就是喲次性的啊

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9樓2011-11-23 17:05:13

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zgb1982

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我們是提擬南芥的，如果只是用來(lái)鑒定轉(zhuǎn)基因苗，用機(jī)器粗提就可以了，我們實(shí)驗(yàn)室也每天都在做轉(zhuǎn)基因苗的鑒定，沒(méi)什么問(wèn)題的。用不著液氮。那樣工作量太大了，太慢了

[ Last edited by zgb1982 on 2011-11-24 at 10:46 ]

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10樓2011-11-24 10:45:05

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A406

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恩擬南芥是可以不用液氮。
直接取幾平方毫米葉子也可以進(jìn)行PCR 但水稻不行

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11樓2011-11-24 15:54:10

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q307078056

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想立刻用？
用酸浸泡，然后再水沖洗，皆可~

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12樓2011-11-24 16:48:52

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sherry_xuxu

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西瓜: 金幣-5, 屏蔽內(nèi)容, 廣告 2012-06-06 18:56:22

本帖內(nèi)容被屏蔽

13樓2011-12-12 21:30:50

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盜鈴者

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A406(金幣+1): 謝謝參與

親啊，，你們的塑料研磨棒是從哪里訂的呀？？拜托了～～3Q！��！

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14樓2012-06-06 18:30:36

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引用回帖:

14樓: Originally posted by 盜鈴者 at 2012-06-06 18:30:36
親啊，，你們的塑料研磨棒是從哪里訂的呀？？拜托了～～3Q�。�！

網(wǎng)上搜索“DNA提取研磨棒”就能出來(lái)好多。
我們的是采購(gòu)部門(mén)提供的，具體哪買(mǎi)的不清楚

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15樓2013-04-19 10:38:45

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kidluag

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不知道放入超聲波振蕩機(jī)里用洗衣粉或者洗潔凈水振蕩一個(gè)小時(shí)是否可行，要么干脆高溫高壓滅菌

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16樓2013-05-25 01:15:44

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梅子清酒

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小木蟲(chóng): 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖

玻璃棒的話用2%醋酸鈉浸泡一會(huì)兒，然后用紙巾擦干就可以了，我提擬南芥的時(shí)候就是這樣的

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17樓2015-03-17 18:47:03

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