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tao8852101銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法的內(nèi)標(biāo)物什么時(shí)候加呢？ 已有14人參與
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各位大俠，我看到有的文獻(xiàn)上內(nèi)標(biāo)物是在樣品前處理后，進(jìn)HPLC之前加入，但這樣做不就失去了內(nèi)標(biāo)法的意義了嗎？（抵消前處理過程中目標(biāo)物的損失）。求助。。。 |
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sciencechn
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padodo(金幣+5, ACI+1): 很詳細(xì)的應(yīng)助！給予獎(jiǎng)勵(lì) 2011-11-30 14:35:25
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你要弄清楚 內(nèi)標(biāo)是用來幫助進(jìn)行內(nèi)標(biāo)法定量的。 談一下我的理解： 處理前樣品中加入回收率內(nèi)標(biāo)（回收率指示物，一般有同位素標(biāo)記的最合適，含量和分析目標(biāo)物的中值或均值相近即可）； 進(jìn)樣之前加入進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)（用性質(zhì)相近化合物，比如13C同位素用來指示回收率，氘代化合物做進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)，最嚴(yán)格的情況就是每個(gè)待測定的目標(biāo)化合物分別用13C和氘代同位素進(jìn)行校正內(nèi)標(biāo)。有時(shí)候GC-MS分析時(shí)候高溫和低溫化合物可能分別需要各自的進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)指示；或是不同性質(zhì)的化合物比如含氯的和含溴的化合物可能儀器響應(yīng)差別大，最好也分別選用各自的內(nèi)標(biāo)） 進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)和標(biāo)準(zhǔn)曲線的內(nèi)標(biāo)濃度一致； 回收率： 一般來說常見的就是基質(zhì)加標(biāo)回收率，空白加標(biāo)回收率；（做方法的文章常見，加標(biāo)回收率通過高低中三個(gè)濃度的化合物加標(biāo)測定） 樣品分析的方法回收率； 這個(gè)通過與回收率內(nèi)標(biāo)（也可以用進(jìn)樣內(nèi)標(biāo)校正響應(yīng)）峰面積比來計(jì)算； |
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acnuxy18樓2011-11-30 12:33:02
sciencechn
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408851978(金幣+1): 謝謝回帖 2011-11-27 07:55:45
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樣品處理之前加入的內(nèi)標(biāo)用來指示回收率的。一般稱之為Surrogate Standards； 進(jìn)樣之前為了校正或是指示基質(zhì)干擾、儀器狀態(tài)、進(jìn)樣等造成的偏差，一般會加入 internal standard；這個(gè)內(nèi)標(biāo)和你用內(nèi)標(biāo)法定量的標(biāo)準(zhǔn)曲線里面的內(nèi)標(biāo)濃度一般應(yīng)該一致（濃度，化合物） [ Last edited by sciencechn on 2011-11-26 at 19:53 ] |
6樓2011-11-26 19:52:22
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5樓2011-11-26 08:01:45
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10樓2011-11-28 09:19:46
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內(nèi)標(biāo)法在具體做的時(shí)候其實(shí)包括兩部分吧，一個(gè)是內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制；一個(gè)是樣品前處理。在繪制內(nèi)標(biāo)法標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，縱、橫坐標(biāo)中，一個(gè)是濃度，一個(gè)比值（待分析物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比，內(nèi)標(biāo)物的濃度是固定的），待分析物的濃度是通過把比值（待分析物與內(nèi)標(biāo)物的比值）代人內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出的，樣品處理雖然會使內(nèi)標(biāo)物有所損失，但是由于待分析物與內(nèi)標(biāo)物濃度是同方向變化的，并不影響定量結(jié)果，這也是內(nèi)標(biāo)法的一個(gè)優(yōu)勢所在。 |
20樓2011-11-30 16:01:49
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