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piaoxue1988木蟲(chóng) (小有名氣)
金蟲(chóng)
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[求助]
高效液相梯度洗脫問(wèn)題
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我目前要用島津LC-10ATVP的高效液相分析一多肽化合物，流動(dòng)相：乙腈-水，檢測(cè)波長(zhǎng)220nm。但摸條件過(guò)程中出現(xiàn)了以下問(wèn)題： （1）等度洗脫時(shí)樣品峰寬的不行，峰寬達(dá)到2min。 （2）梯度洗脫時(shí)基線漂移嚴(yán)重，而且進(jìn)空樣也會(huì)出現(xiàn)雜峰（柱子是新的，只做我我的樣品，而且我的樣品是上過(guò)制備HPLC的，比較純）。 由于我是第一次用島津LC-10ATVP高效液相作分析，所以不知道對(duì)一個(gè)新的化合物如何摸條件才能使它的峰型好一些，基線平一些，梯度應(yīng)該怎么設(shè)置呢？希望大家能夠指點(diǎn)指點(diǎn)，再此謝了！��！ |
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
jiangchunyong(金幣+1): 謝謝 2011-11-29 20:05:53
piaoxue1988(金幣+3): 2011-11-29 20:22:46
piaoxue1988: 金幣+2 2012-04-13 21:44:53
jiangchunyong(金幣+1): 謝謝 2011-11-29 20:05:53
piaoxue1988(金幣+3): 2011-11-29 20:22:46
piaoxue1988: 金幣+2 2012-04-13 21:44:53
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提一點(diǎn)小建議，梯度洗脫是容易出現(xiàn)雜峰，如果等度洗脫只是峰寬的問(wèn)題，為什么不試一試在次基礎(chǔ)上優(yōu)化一下條件呢，譬如流動(dòng)相的配比是否合適，流速，或者流動(dòng)相的pH值，我沒(méi)有分離過(guò)多肽化合物，流動(dòng)相只能用乙腈和水嗎？我不太清楚，可不可以換用濃度小的鹽呢！ 還有我也走過(guò)梯度洗脫，如果梯度合適的話也可以沒(méi)有雜峰的，不過(guò)這得大膽的去嘗試嘍，雖然條件不太好摸，但是選好了梯度，峰型是不錯(cuò)的！ |
2樓2011-11-29 19:37:05
piaoxue1988
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9樓2012-06-11 16:24:06
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