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piaoxue1988木蟲 (小有名氣)
金蟲
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[求助]
高效液相梯度洗脫問題
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我目前要用島津LC-10ATVP的高效液相分析一多肽化合物，流動相：乙腈-水，檢測波長220nm。但摸條件過程中出現(xiàn)了以下問題： （1）等度洗脫時樣品峰寬的不行，峰寬達(dá)到2min。 （2）梯度洗脫時基線漂移嚴(yán)重，而且進(jìn)空樣也會出現(xiàn)雜峰（柱子是新的，只做我我的樣品，而且我的樣品是上過制備HPLC的，比較純）。 由于我是第一次用島津LC-10ATVP高效液相作分析，所以不知道對一個新的化合物如何摸條件才能使它的峰型好一些，基線平一些，梯度應(yīng)該怎么設(shè)置呢？希望大家能夠指點(diǎn)指點(diǎn)，再此謝了�。�！ |
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鐵桿木蟲 (正式寫手)
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5樓2011-12-01 19:44:32
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
jiangchunyong(金幣+1): 謝謝 2011-11-29 20:05:53
piaoxue1988(金幣+3): 2011-11-29 20:22:46
piaoxue1988: 金幣+2 2012-04-13 21:44:53
jiangchunyong(金幣+1): 謝謝 2011-11-29 20:05:53
piaoxue1988(金幣+3): 2011-11-29 20:22:46
piaoxue1988: 金幣+2 2012-04-13 21:44:53
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提一點(diǎn)小建議，梯度洗脫是容易出現(xiàn)雜峰，如果等度洗脫只是峰寬的問題，為什么不試一試在次基礎(chǔ)上優(yōu)化一下條件呢，譬如流動相的配比是否合適，流速，或者流動相的pH值，我沒有分離過多肽化合物，流動相只能用乙腈和水嗎？我不太清楚，可不可以換用濃度小的鹽呢！ 還有我也走過梯度洗脫，如果梯度合適的話也可以沒有雜峰的，不過這得大膽的去嘗試嘍，雖然條件不太好摸，但是選好了梯度，峰型是不錯的！ |
2樓2011-11-29 19:37:05
piaoxue1988
木蟲 (小有名氣)
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3樓2011-11-29 20:31:41
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4樓2011-12-01 18:00:00
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