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qinghua_lin新蟲(chóng) (初入文壇)
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[求助]
甲基磺酸乙酯誘變
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| 請(qǐng)問(wèn)各位甲基磺酸乙酯誘變時(shí)應(yīng)該如何操作呢？加入5%硫代硫酸鈉后是不是可以直接解毒使用了呢?還有是控制5%硫代硫酸鈉的終濃度還是按多少比例加入5%硫代硫酸鈉？希望各位能盡快幫幫忙，謝謝啦！ |
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qinghua_lin
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3樓2011-12-03 14:38:54
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
amisking(金幣+3): 鼓勵(lì)發(fā)帖交流。 2011-12-01 19:40:02
amisking(金幣+3): 鼓勵(lì)發(fā)帖交流。 2011-12-01 19:40:02
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EMS的誘變處理方法： ① EMS 母液的配制：為了安全和防上失效，配制前將需用的器皿，置冰箱內(nèi)預(yù)冷，然后在冰浴中進(jìn)行配制。取0.5ml EMS原液，加人到10 ml pH7.2磷酸緩沖液中，加蓋，并輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)試管。由于在水溶液中易失效，故盡可能低溫保藏，并要現(xiàn)用現(xiàn)配。 ②取新鮮的菌體，經(jīng)前培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期．離心洗滌，用緩沖液制成8 ml菌懸液（107-108ml-1）。對(duì)于絲狀菌孢子，則前培養(yǎng)至萌動(dòng)期，懸液含 106 ml-1。 ③取EMS母液2ml，加人到以8ml的菌懸液中。在適宜溫度下處理一定時(shí)間（根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)緒果確定）。處理的最終濃度為0 .lmol／L。對(duì)于真菌孢子，則為0.2-0.5rnol／L。 ④EMS處理一定時(shí)間后，用50倍生理鹽水稀釋或加入一定量的2%NaS2O3溶液或多次離心、洗滌，以終止反應(yīng)。 EMS是劇毒的誘變劑，在整個(gè)誘變過(guò)程，包括配制藥品、操作處理、保存等都要嚴(yán)守安全，不能接觸皮膚，所有接觸過(guò)EMS的器皿，單獨(dú)用大量水沖洗洗滌，或用10％NaS2O3溶液浸泡過(guò)夜，再用清水沖洗干凈。 |
2樓2011-12-01 13:13:14
qinghua_lin
新蟲(chóng) (初入文壇)
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4樓2011-12-03 14:41:09
kidluag
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
zhang8826857(金幣+5): 鼓勵(lì)交流 2012-02-22 12:37:59
zhang8826857(金幣+5): 鼓勵(lì)交流 2012-02-22 12:37:59
當(dāng)然有毒性啊，硫代硫酸鈉和EMS 是分別兩種不同的有毒物質(zhì)，不過(guò)是EMS 毒性更大容易直接引起人類的癌變而已，先不說(shuō)那味道對(duì)人的影響，你就那么繼續(xù)培養(yǎng)估計(jì)你的實(shí)驗(yàn)材料也受不了啊，會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)條件培養(yǎng)基成分PH的多種不可控制的變化。正常情況應(yīng)該是終止后在超凈臺(tái)中用離心機(jī)低速離心提純重新放置到?jīng)]有任何誘變劑的培養(yǎng)液中培養(yǎng)的，我很佩服你的嘗試精神，不過(guò)怎么也不能帶著EMS和硫代硫酸鈉一起培養(yǎng)啊，你和材料都會(huì)受影響的。  |
5樓2012-02-22 03:55:36
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