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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 實驗/技術 » 甲基磺酸乙酯誘變
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[求助]
甲基磺酸乙酯誘變
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| 請問各位甲基磺酸乙酯誘變時應該如何操作呢？加入5%硫代硫酸鈉后是不是可以直接解毒使用了呢?還有是控制5%硫代硫酸鈉的終濃度還是按多少比例加入5%硫代硫酸鈉？希望各位能盡快幫幫忙，謝謝啦！ |
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【答案】應助回帖
★ ★ ★
amisking(金幣+3): 鼓勵發(fā)帖交流。 2011-12-01 19:40:02
amisking(金幣+3): 鼓勵發(fā)帖交流。 2011-12-01 19:40:02
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EMS的誘變處理方法： ① EMS 母液的配制：為了安全和防上失效，配制前將需用的器皿，置冰箱內預冷，然后在冰浴中進行配制。取0.5ml EMS原液，加人到10 ml pH7.2磷酸緩沖液中，加蓋，并輕輕轉動試管。由于在水溶液中易失效，故盡可能低溫保藏，并要現用現配。 ②取新鮮的菌體，經前培養(yǎng)至對數期．離心洗滌，用緩沖液制成8 ml菌懸液（107-108ml-1）。對于絲狀菌孢子，則前培養(yǎng)至萌動期，懸液含 106 ml-1。 ③取EMS母液2ml，加人到以8ml的菌懸液中。在適宜溫度下處理一定時間（根據預實驗緒果確定）。處理的最終濃度為0 .lmol／L。對于真菌孢子，則為0.2-0.5rnol／L。 ④EMS處理一定時間后，用50倍生理鹽水稀釋或加入一定量的2%NaS2O3溶液或多次離心、洗滌，以終止反應。 EMS是劇毒的誘變劑，在整個誘變過程，包括配制藥品、操作處理、保存等都要嚴守安全，不能接觸皮膚，所有接觸過EMS的器皿，單獨用大量水沖洗洗滌，或用10％NaS2O3溶液浸泡過夜，再用清水沖洗干凈。 |
2樓2011-12-01 13:13:14
3樓2011-12-03 14:38:54
4樓2011-12-03 14:41:09
kidluag
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【答案】應助回帖
感謝參與，應助指數 +1
zhang8826857(金幣+5): 鼓勵交流 2012-02-22 12:37:59
zhang8826857(金幣+5): 鼓勵交流 2012-02-22 12:37:59
當然有毒性啊，硫代硫酸鈉和EMS 是分別兩種不同的有毒物質，不過是EMS 毒性更大容易直接引起人類的癌變而已，先不說那味道對人的影響，你就那么繼續(xù)培養(yǎng)估計你的實驗材料也受不了啊，會導致培養(yǎng)條件培養(yǎng)基成分PH的多種不可控制的變化。正常情況應該是終止后在超凈臺中用離心機低速離心提純重新放置到沒有任何誘變劑的培養(yǎng)液中培養(yǎng)的，我很佩服你的嘗試精神，不過怎么也不能帶著EMS和硫代硫酸鈉一起培養(yǎng)啊，你和材料都會受影響的。  |
5樓2012-02-22 03:55:36
魂斷生物
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6樓2012-07-21 15:44:59
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9樓2021-11-08 15:01:22
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