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qinghua_lin新蟲 (初入文壇)
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[求助]
甲基磺酸乙酯誘變
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| 請問各位甲基磺酸乙酯誘變時應(yīng)該如何操作呢?加入5%硫代硫酸鈉后是不是可以直接解毒使用了呢?還有是控制5%硫代硫酸鈉的終濃度還是按多少比例加入5%硫代硫酸鈉?希望各位能盡快幫幫忙,謝謝啦! |
新蟲 (正式寫手)
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EMS的誘變處理方法: ① EMS 母液的配制:為了安全和防上失效,配制前將需用的器皿,置冰箱內(nèi)預(yù)冷,然后在冰浴中進(jìn)行配制。取0.5ml EMS原液,加人到10 ml pH7.2磷酸緩沖液中,加蓋,并輕輕轉(zhuǎn)動試管。由于在水溶液中易失效,故盡可能低溫保藏,并要現(xiàn)用現(xiàn)配。 ②取新鮮的菌體,經(jīng)前培養(yǎng)至對數(shù)期.離心洗滌,用緩沖液制成8 ml菌懸液(107-108ml-1)。對于絲狀菌孢子,則前培養(yǎng)至萌動期,懸液含 106 ml-1。 ③取EMS母液2ml,加人到以8ml的菌懸液中。在適宜溫度下處理一定時間(根據(jù)預(yù)實驗緒果確定)。處理的最終濃度為0 .lmol/L。對于真菌孢子,則為0.2-0.5rnol/L。 ④EMS處理一定時間后,用50倍生理鹽水稀釋或加入一定量的2%NaS2O3溶液或多次離心、洗滌,以終止反應(yīng)。 EMS是劇毒的誘變劑,在整個誘變過程,包括配制藥品、操作處理、保存等都要嚴(yán)守安全,不能接觸皮膚,所有接觸過EMS的器皿,單獨用大量水沖洗洗滌,或用10%NaS2O3溶液浸泡過夜,再用清水沖洗干凈。 |
新蟲 (初入文壇)
新蟲 (初入文壇)
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