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NANASS

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[交流] 養(yǎng)細胞養(yǎng)地好煩

最近在養(yǎng)胃癌細胞AGS，狀態(tài)一直不好，好不容易長起來，胰酶消化后，竟然一大片都從培養(yǎng)瓶上掉下來，并不是分散成單個細胞，好苦惱啊�。《遗囵B(yǎng)時會有點點，都快暈了！萬惡的細胞呀！大家有沒有遇到此種情況，還望指點迷津。。。謝謝大家！

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1樓 2011-12-04 11:45:25

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fxgowen

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沒做過癌細胞實驗，樓主還是不要著急，其實和養(yǎng)菌一樣，找到規(guī)律自然就能養(yǎng)好了

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2樓2011-12-04 15:45:19

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btx362237729

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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
amisking(金幣+1): 鼓勵發(fā)帖交流。 2011-12-04 18:49:44

我今天才開始正式養(yǎng)細胞。。。。。。細胞比養(yǎng)大腸桿菌麻煩無數(shù)倍

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3樓2011-12-04 18:48:14

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sansei_stone

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NANASS(金幣+1): 謝謝哦！ 2011-12-05 14:33:25

……
消化后當然是成團了
要用槍吹打打開
lz真是新手啊……

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4樓2011-12-04 19:30:48

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julietguo

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NANASS(金幣+1): 謝謝 2011-12-05 14:22:17

我也剛開始養(yǎng)細胞，與樓主一起加油��！我們這邊是先用加EDTA的胰酶消化，等細胞間隙增大，細胞變圓的時候，用毛細多吹打幾次，把細胞吹打下來。

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5樓2011-12-04 19:47:52

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yqq-nobel

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NANASS(金幣+1): 謝謝 2011-12-05 14:24:03

樓主淡定，養(yǎng)細胞最怕的就是操作污染了。消化的時候，如果時間把握不好，胰酶可以PBS稀釋點，延長消化時間，我剛開始養(yǎng)細胞的時候就是因為消化過度，把細胞給搞殘了，長了好幾天才長好，

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6樓2011-12-04 20:27:36

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linyingjia

至尊木蟲 (職業(yè)作家)

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NANASS(金幣+1): 謝謝 2011-12-05 14:24:14

胰酶濃度不能太大不能用火燒沾過細胞的東西在加培養(yǎng)基
細胞培養(yǎng)的原料藥質(zhì)量可靠你的血清、培養(yǎng)基是哪家的啊

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7樓2011-12-04 20:46:25

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cxl_yll

木蟲 (正式寫手)

★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖

癌細胞還不好養(yǎng)啊，長得又快又好，給個環(huán)境就能生存。

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10樓2011-12-05 17:54:27

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bietaikeqiu

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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
NANASS(金幣+1): 2011-12-06 08:33:51

有點點可能是染菌了
都消化掉了可能是時間沒把握好
以后操作多注意，養(yǎng)的時間長了、熟練了就好了。。。。

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11樓2011-12-05 19:24:22

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NANASS

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10樓: Originally posted by cxl_yll at 2011-12-05 17:54:27:
癌細胞還不好養(yǎng)啊，長得又快又好，給個環(huán)境就能生存。

是有點難養(yǎng)，一陣一陣滴！

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12樓2011-12-06 08:29:34

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zhjichen

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NANASS(金幣+1): 2011-12-06 08:32:21

LZ要耐住性子啊，我也是養(yǎng)細胞的新手，前面的人說的對，養(yǎng)細胞首先要保證沒有污染，其次才是保證長的狀態(tài)好不好。慢慢來，多向周圍的高手學(xué)習，多看別人操作。

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13樓2011-12-06 08:29:36

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NANASS

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引用回帖:

11樓: Originally posted by bietaikeqiu at 2011-12-05 19:24:22:
有點點可能是染菌了
都消化掉了可能是時間沒把握好
以后操作多注意，養(yǎng)的時間長了、熟練了就好了。。。。

嗯嗯……謝謝！O(∩_∩)O~

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14樓2011-12-06 08:30:25

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NANASS

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引用回帖:

13樓: Originally posted by zhjichen at 2011-12-06 08:29:36:
LZ要耐住性子啊，我也是養(yǎng)細胞的新手，前面的人說的對，養(yǎng)細胞首先要保證沒有污染，其次才是保證長的狀態(tài)好不好。慢慢來，多向周圍的高手學(xué)習，多看別人操作。

嗯嗯，呵呵……共同進步！

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15樓2011-12-06 08:31:41

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sxxuan

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★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖

AGS在幾株胃癌細胞中是比較麻煩的，生長速度不快，而且要很有耐心才行
如果有點點，可以重新復(fù)蘇一株，也有可能是細胞狀態(tài)差，這個要勤換液
消化的時候用PBS稀釋一下胰酶，減緩脫壁的時間，這個也是要自己摸索的
養(yǎng)細胞要有耐性，如果細胞密度不夠，先不要傳代，等細胞密度上去了再傳代，狀態(tài)會好很多的

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NANASS

16樓2011-12-06 09:04:04

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送鮮花一朵

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16樓: Originally posted by sxxuan at 2011-12-06 09:04:04:
AGS在幾株胃癌細胞中是比較麻煩的，生長速度不快，而且要很有耐心才行
如果有點點，可以重新復(fù)蘇一株，也有可能是細胞狀態(tài)差，這個要勤換液
消化的時候用PBS稀釋一下胰酶，減緩脫壁的時間，這個也是要自己摸索的 ...

嗯嗯，謝謝您！不知您有沒有養(yǎng)過A375、Hela、BGC這幾株細胞呀，哪個好養(yǎng)些呀？還望您賜教！O(∩_∩)O~

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17樓2011-12-07 20:45:37

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sxxuan

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17樓: Originally posted by NANASS at 2011-12-07 20:45:37:
嗯嗯，謝謝您！不知您有沒有養(yǎng)過A375、Hela、BGC這幾株細胞呀，哪個好養(yǎng)些呀？還望您賜教！O(∩_∩)O~

A375沒養(yǎng)過。Hela和BGC都挺好養(yǎng)的。一開始就看細胞復(fù)蘇的狀態(tài)如何，這個不是自己能把握的因為和凍存有關(guān)，不過離心后細胞會長得好一點。只要復(fù)蘇成功了，到后面基本就是瘋長

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18樓2011-12-08 09:39:40

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18樓: Originally posted by sxxuan at 2011-12-08 09:39:40:
A375沒養(yǎng)過。Hela和BGC都挺好養(yǎng)的。一開始就看細胞復(fù)蘇的狀態(tài)如何，這個不是自己能把握的因為和凍存有關(guān)，不過離心后細胞會長得好一點。只要復(fù)蘇成功了，到后面基本就是瘋長

OK，謝謝！O(∩_∩)O~

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19樓2011-12-09 08:50:23

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peng5053

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NANASS(金幣+1): 2011-12-16 20:24:30

養(yǎng)細胞一定要心平氣和，慢慢去摸索，體會，多和別人交流。時間久了就會好起來的。

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20樓2011-12-09 17:05:03

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labbench

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★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖

消化時間縮短唄。比如室溫30秒，就吸走。

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21樓2012-12-17 18:31:22

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簡單回復(fù)

feiwuqq8樓

2011-12-05 08:11 回復(fù)

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2011-12-05 08:26 回復(fù)

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