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juanjiang金蟲 (小有名氣)
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HPLC保留時間規(guī)律前移
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| 我的樣品是氟尿嘧啶的透皮樣品,采用的流動性是重蒸水(USP藥典條件),C18柱,流速為1mi/min,柱溫為40℃,進標(biāo)準(zhǔn)品的時候峰型很好,保留時間也較穩(wěn)定。但是進透皮樣品后,峰型變差,而且保留時間規(guī)律遷移(每個樣品往前移動0.02左右),一天下來可從5分多鐘移動到3分鐘。網(wǎng)上說可能是柱子沒有平衡好,但我每次都平衡很長時間,基線都很平,進樣后就不太平了。為了避免前后兩個樣品之間的影響,每個樣品我都采集了雙倍的時間。請教高手指出是什么原因造成保留時間規(guī)律前移?怎么解決? |
版主 (文壇精英)
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鐵桿木蟲 (小有名氣)
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| 樓主用的C18柱應(yīng)該是普通的C18柱。因為你的流動相是純水,而C18鏈?zhǔn)鞘杷缘模虼擞龅剿髸捎谑杷饬Χ鴮?dǎo)致C18鏈的傾覆,而且這個傾覆是不可逆的,這樣就會產(chǎn)生像樓主所說的保留時間原來越提前的現(xiàn)象,這等于是一種變相的固定相的流失,從而導(dǎo)致保留能力愈來愈弱,進而出現(xiàn)保留時間提前的現(xiàn)象。我建議樓主購買親水相的色譜柱,其實就是在硅膠與C18鏈鍵合鍵之間加入了極性的親水基團,在使用純水相的時候,這個親水基團和水產(chǎn)生作用力而保護C18鏈不受疏水的斥力影響從而產(chǎn)生穩(wěn)定的色譜行為。樓主還有什么疑問多和大家交流溝通吧。 |

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