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[交流]
雙縮脲測(cè)乳中的酪蛋白中的問題 已有3人參與
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最近在測(cè)乳中的酪蛋白,可是整死我了。樣品處理完后,發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀,我了個(gè)暈了,最后測(cè)下來顯然不對(duì)了,吸光度極高。我重復(fù)了好幾遍,都陣亡了。不得不讓我改方法啊。但是見很多文獻(xiàn)上都是這么測(cè)的,我就不解,為什么我就重復(fù)不了。各位大牛們,給小弟解答解答吧!謝謝! |
鐵桿木蟲 (著名寫手)
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制(這個(gè)就不說了,肯定沒問題,做出來是3個(gè)9) 2、樣品的測(cè)定 吸取10ml乳樣,加入等量的pH=4.6的HAC-NaAC緩沖液(0.2mol/l),混勻,沉淀酪蛋白。然后在4000r/min下離心10min,收集沉淀用于測(cè)定酪蛋白含量。為防止酪蛋白沉淀中混有脂肪而影響測(cè)定,再用10ml乙醚-乙醇混合液(體積比1:1)洗滌并在上述條件下離心,收集沉淀,用0.1mol/lNaOH溶解,并準(zhǔn)確定容到50ml。然后取酪蛋白溶解也1ml,加4ml雙縮脲試劑,室溫下反應(yīng)30min,在540nm下測(cè)定吸光值,并與標(biāo)準(zhǔn)曲線比對(duì),計(jì)算酪蛋白含量。 方法就是這樣,但就是樣品測(cè)定時(shí)候吸光度極高,而且我發(fā)覺有絮狀沉淀。 |
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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