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gl19860312木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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流式細(xì)胞術(shù)詳解 22章節(jié)
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一. 流式細(xì)胞術(shù)概述 流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry, FCM)是七十年代發(fā)展起來(lái)的高科學(xué)技術(shù),它集計(jì)算機(jī)技術(shù)、激光技術(shù)、流體力學(xué)、細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞免疫學(xué)于一體, 同時(shí)具有分析和分選細(xì)胞功能。它不僅可測(cè)量細(xì)胞大小、內(nèi)部顆粒的性狀,還可檢測(cè)細(xì)胞表面和細(xì)胞漿抗原、細(xì)胞內(nèi)DNA、RNA含量等,可對(duì)群體細(xì)胞在單細(xì)胞水平上進(jìn)行分析, 在短時(shí)間內(nèi)檢測(cè)分析大量細(xì)胞,并收集、儲(chǔ)存和處理數(shù)據(jù),進(jìn)行多參數(shù)定量分析; 能夠分類(lèi)收集(分選)某一亞群細(xì)胞,分選純度＞95%。在血液學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、藥物學(xué)、分子生物學(xué)等學(xué)科廣泛應(yīng)用。 國(guó)內(nèi)使用的流式細(xì)胞儀主要由美國(guó)的兩個(gè)廠家生產(chǎn):BECKMAN- COULTER公司和Becton-Dickinson公司(簡(jiǎn)稱(chēng)B-D公司)。流式細(xì)胞儀主要有兩型:臨床型（又稱(chēng)小型機(jī)、臺(tái)式機(jī)）和綜合型（又稱(chēng)大型機(jī)、分析型）。BECKMAN-COULTER公司最新產(chǎn)品為EPICS ALTRA和EPICS XL/XL-MCL, B-D公司最新產(chǎn)品為FACS Vantage和FACS Calibur。EPICS XL/XL-MCL和FACS Calibur是臨床型;EPICS ALTRA和 FACS Vantage是綜合型，除具備檢測(cè)分析功能外,還具有細(xì)胞分選功能,多用于科學(xué)研究。 |
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四. 流式細(xì)胞儀主要構(gòu)造和工作原理 激光光源及光束形成系統(tǒng) 流式細(xì)胞儀可配備一根或多根激光管，常用的激光管是氬離子氣體激光管，它的發(fā)射光波長(zhǎng)488ηm,此外可配備氦氖離子氣體激光管（波長(zhǎng)633ηm）和/或紫外激光管。 流式細(xì)胞儀的主要測(cè)定信號(hào)熒光是由激發(fā)光激發(fā)的，熒光信號(hào)的強(qiáng)弱與激發(fā)光的強(qiáng)度和照射時(shí)間相關(guān)，激光是一種相干光源,它能提供單波長(zhǎng)、高強(qiáng)度、高穩(wěn)定性的光照，正是能達(dá)到這一要求的理想的激發(fā)光光源。 在激光光源和流動(dòng)室之間有兩個(gè)圓柱形透鏡，將激光光源發(fā)出的橫截面為圓形的激光光束聚焦成橫截面較小的橢圓形激光光束(22μm×66μm)，在這種橢圓形激光光斑內(nèi)激光能量成正態(tài)分布，使通過(guò)激光檢測(cè)區(qū)的細(xì)胞受照強(qiáng)度一致。 |
2樓2012-01-02 16:30:56
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二十二. 流式細(xì)胞術(shù)在血液學(xué)中的應(yīng)用 其他 流式細(xì)胞儀可能在兩方面對(duì)骨髓增生異常綜合癥（MDS）有用，一是測(cè)定CD34陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，以監(jiān)測(cè)病情，二是測(cè)定核蛋白增殖因子（PCNA）,有報(bào)告PCNA再在生障礙性貧血、骨髓增生異常綜合癥、白血病三種疾病中表達(dá)有明顯差異，可輔助鑒別診斷。 此外流式細(xì)胞儀也可檢耐藥蛋白,如肺耐藥相關(guān)蛋白（LRP）、多藥耐藥蛋白（MRP）、 P170等。 流式細(xì)胞儀也可檢測(cè)細(xì)胞因子，細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子如白介素系列（IL-1—IL-14）,腫瘤壞死因子(TNF),干擾素(IFN)等,只要用適當(dāng)?shù)拇蚩讋┘纯捎每股鲜黾?xì)胞因子單克隆抗體標(biāo)記后用流式細(xì)胞儀測(cè)定。 參考文獻(xiàn) |
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