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楊文心木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
急求助幾個(gè)coupling buffer的配制�。�！
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1. 0.1M Tris-Hcl PH 8.0 2. 0.1 M NaHCO3 pH 8.3 containing 0.5 M NaCl 3. 0.1 M acetic acid/sodium acetate, pH 4.0 containing 0.5 M NaCl 4. 0.1 M Tris-HCl, pH 8.0 containing 0.5 M NaCl. 本人實(shí)驗(yàn)中需要用到以上幾個(gè)coupling buffer，以前沒(méi)做過(guò)生物方面的實(shí)驗(yàn)，不知道該如何配制它們，希望各位蟲(chóng)友能夠告知準(zhǔn)確配制它們的方法（具體的用量和操作方法以及注意事項(xiàng)），感激不盡！ 另請(qǐng)教： 1.見(jiàn)過(guò)別的資料上有些講了其中一些buffer的配制方法，但是濃度或者PH不同，請(qǐng)問(wèn)可以按照其方法配制好了后再直接稀釋相應(yīng)的倍數(shù)然后直接用對(duì)應(yīng)的酸堿調(diào)PH嗎？ 2.如果可以，那么第2個(gè)buffer該用什么調(diào)PH呢？能用NaOH溶液?jiǎn)�？該用多大濃度的NaOH調(diào)呢？ 3.文獻(xiàn)中說(shuō)后面3個(gè)buffer溶液中都containing 0.5 M NaCl ，這是怎么配制的呢？應(yīng)該不是分別配制兩個(gè)溶液再混合在一起吧，那么又該如何配制呢？ |
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7樓2012-10-26 11:16:53
lxj341401
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
wanhscn(金幣+5, 專家考核): 感謝專業(yè)的應(yīng)助！whs 2012-01-05 11:35:27
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wanhscn(金幣+5, 專家考核): 感謝專業(yè)的應(yīng)助！whs 2012-01-05 11:35:27
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你可以這樣配： 1.先配1MTris-Cl，pH8.0母液，0.2MNaHCO3/NaCO3,pH8.3母液，1 M acetic acid/sodium acetate, pH 4.0母液，5M NaCl母液。 1MTris-Cl，pH8.0母液：用濃HCl調(diào)pH直到8.0，定容。 0.2MNaHCO3/NaCO3,pH8.3母液：先分別配好0.2MNaHCO3和0.2M NaCO3，然后兩個(gè)溶液兌在一起直到pH到8.3. 1 M acetic acid/sodium acetate, pH 4.0母液：先配好1 M acetic acid和1M sodium acetate,然后兩個(gè)溶液兌在一起直到 pH為4.0。 2.你要配的4種buffer就只需要先算好需要用的母液量，最后再定容就可以了。定容的水最好是超純水，這樣就不會(huì)影響pH。 比如配1L的Buffer4:0.1 M Tris-HCl, pH 8.0 containing 0.5 M NaCl：量筒中加入100ml 1MTris-Cl，pH8.0母液,100ml 5M NaCl，加入超純水至體積到1L即可。 |
3樓2012-01-05 11:22:04
楊文心
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楊文心: 回帖置頂 2012-01-06 10:46:45
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先謝謝你的回答！然后我再弱弱的問(wèn)下，對(duì)于① ④可以直接配制成0.1M的濃度嗎？請(qǐng)教下我若按如下方法配制① ④是否可行： ① 0.1M Tris-HCl PH 8.0 先稱12.11g Tris堿溶于950mL～970mL 無(wú)離子水中，邊攪拌邊滴加濃 HCl， 用pH計(jì)測(cè)定溶液pH值至所需的pH值，然后再加水補(bǔ)足到1L。 ④ 0.1 M Tris-HCl, pH 8.0 containing 0.5 M NaCl 先稱12.11g Tris堿溶于950mL～970mL 無(wú)離子水中，再加入24.25g NaCl邊攪拌邊滴加濃 HCl，用pH計(jì)測(cè)定溶液pH值至所需的pH值，然后再加水補(bǔ)足到1L。 |
4樓2012-01-06 10:28:09
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