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老實(shí)人sdu3375木蟲 (正式寫手)
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[求助]
從骨髓中分離造血干細(xì)胞
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| 小蟲想從大鼠股骨的骨髓中分離出造血干細(xì)胞(或者有核細(xì)胞),進(jìn)行RT-PCR。但不知道應(yīng)該怎樣分離?愁死我了……希望大家給點(diǎn)建議啊~~謝謝了。! |
鐵桿木蟲 (小有名氣)
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我感覺我大鼠的骨髓中有些塊狀的東西,且較致密……不知道是什么?您看我這樣進(jìn)行操作行否? 1、用生理鹽水將骨髓沖到離心管中,進(jìn)行離心。3000r/min,10min.收集細(xì)胞,棄上清。 2、將收集的細(xì)胞用約2ml生理鹽水重懸,而后小心加到1.077約12ml的ficoll液中。 3、用帶有水平轉(zhuǎn)子的離心機(jī)進(jìn)行離心,1500r/min,20min. 4、收集中間白色的細(xì)胞即為單個(gè)核細(xì)胞。 想向您請(qǐng)教一下:我的這個(gè)轉(zhuǎn)速和時(shí)間可以嗎?因?yàn)槲业臉悠酚邢,不敢再用來做預(yù)實(shí)驗(yàn)了……謝謝您了! |
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