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ttzhu666鐵蟲 (初入文壇)
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[求助]
發(fā)酵3hOD下降到0.4后不降了,發(fā)酵液變澄清,溶氧不變,pH上升,這是什么原因
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| 發(fā)酵一開始很正常,3h后OD反而下降,到0.4后不降了,發(fā)酵液變澄清,溶氧不變,pH上升,這是什么原因,請高手指點(diǎn) |
木蟲 (著名寫手)
木蟲 (著名寫手)
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根據(jù)樓主的描述,在排除染菌的情況,DO下降、pH上升這應(yīng)該是一種正,F(xiàn)象。這可能是供氧不足的原因,導(dǎo)致菌體生長異常; 另外,發(fā)酵液變得澄清,這一點(diǎn)有點(diǎn)莫名其妙,即使是染雜菌或染噬菌體的話,發(fā)酵液也不應(yīng)該變澄清,不太符合常理。不知樓主所說的變澄清是不是相對于沒接種前的粘稠發(fā)酵培養(yǎng)基含來說的,要是這樣的話,應(yīng)該說變稀了。 所以,發(fā)現(xiàn)發(fā)酵異常的情況下,可以以下幾點(diǎn)進(jìn)行分析: 1.進(jìn)行發(fā)酵液顏色、氣味等觀察,是否有異味。因?yàn)檎0l(fā)酵的話,發(fā)酵 液氣味一般是比較純正的。同時(shí)與以往正常的發(fā)酵液、氣味進(jìn)行比較, 2.進(jìn)行鏡檢,觀察菌體形態(tài),并與以往正常菌體形態(tài)進(jìn)行比較;是否出現(xiàn)雜菌或菌體自溶現(xiàn)象。 3.看看轉(zhuǎn)速以及通氣量是否合適,因?yàn)榧?xì)菌不同培養(yǎng)階段,需氧量是不同的。通過調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速和通氣量來達(dá)到所需要的溶氧量(DO)。 |
新蟲 (初入文壇)
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我也用構(gòu)建的大腸桿菌進(jìn)行發(fā)酵罐發(fā)酵,也出現(xiàn)過你這種情況。我在變溫后加入誘導(dǎo)劑和補(bǔ)加甘油,在2h后就出現(xiàn)發(fā)酵液變稀,OD下降,DO變化不大,pH上升,發(fā)酵液中有很多白色團(tuán)狀物質(zhì),發(fā)酵液氣味也出現(xiàn)變化,有種腐臭的味道,很難聞,但是如果停止補(bǔ)加甘油和乳糖,過10h后,菌體又重新長起來,且能測到酶活。 第二次出現(xiàn)這種問題時(shí),我改變了發(fā)酵策略,降低了發(fā)酵培養(yǎng)基中甘油的含量(TB ),變溫誘導(dǎo)時(shí)甘油和誘導(dǎo)劑同時(shí)流加,且甘油的流加速率要高于誘導(dǎo)劑的流加速率,這樣以后再也沒有出現(xiàn)菌體自溶或沉降現(xiàn)象。 表述有點(diǎn)不好,見諒。 |
木蟲之王 (文學(xué)泰斗)
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