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lepapillon7新蟲 (小有名氣)
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[求助]
請教關(guān)于enterokinase的問題
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新手剛剛學(xué)習(xí)用pET32系統(tǒng)表達(dá)蛋白,后續(xù)需用腸激酶切除TRX標(biāo)簽。 請問在最初大腸桿菌裂解時的蛋白酶抑制劑應(yīng)該用那哪種呢?是不是不能用cocktail或者PMSF了。 此外,若是第一步純化蛋白用Ni柱純化,洗脫之后。是直接將蛋白濃縮后,透析到腸激酶反應(yīng)的的buffer中嗎。還是可以直接用濃縮后的蛋白加入到腸激酶反應(yīng)體系中? 請問哪里有這方面實(shí)驗(yàn)詳細(xì)的介紹嗎? 謝謝 不勝感激 |
新蟲 (初入文壇)
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