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intron5811銅蟲 (小有名氣)
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[交流]
要做抗體,如何選擇用哪段序列來表達蛋白? 已有4人參與
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要做抗體,如何選擇用哪段序列來表達蛋白?如何保證抗體的特異性? 我是新人,沒做過表達蛋白來做抗體。 我有這個基因的序列,但是編碼的蛋白很長,有大概一千個AA。 其中很重要的 domain 包括 C 端有一個,N 端有一個,N 端的很長,保守性也挺好,有若干個 HOMOLOG。如果選擇N 端的話,會不會保守性不太好呢?或者我應該怎么選擇呢?該用多長的片段呢?或者有沒有直接的文獻可以閱讀參考呢?謝謝。 |
實驗技術 |
木蟲 (正式寫手)
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表達抗體,最重要的是要表達出與抗原結(jié)合的區(qū)段。因為這部分是直接與你的抗原相結(jié)合的,只有正確表達了抗體的抗原結(jié)合區(qū)才能發(fā)揮免疫作用。 一般抗體與抗原結(jié)合的部分為抗體的N段的CDR區(qū)。要弄清楚你的抗體抗原結(jié)合區(qū),你可以做一個抗原結(jié)合表位作圖,通過實驗測定你的抗體的抗原結(jié)合區(qū)。也可以查閱文獻,看看你的抗體是結(jié)合抗原的哪個抗原決定族的。 |
木蟲 (小有名氣)
銅蟲 (小有名氣)
鐵桿木蟲 (正式寫手)
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