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nam2009金蟲 (小有名氣)
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[求助]
聚酰胺柱內(nèi)的保留體積與柱體積的區(qū)別
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小生在看實驗指導(dǎo)時有些疑問，請給以指導(dǎo)。 實驗操作如下 裝柱：稱取色譜用聚酰胺6克，置200ml燒杯中，加蒸餾水100ml輕輕搖勻，放置過夜，使之充分膨脹。裝柱前輕輕攪動并傾去上層混濁液，下層再加蒸餾水復(fù)洗兩次（注意計算水量，以計算柱內(nèi)保留體積）。將洗好的聚酰胺連水一次倒入已處理好的柱內(nèi)，打開下口開關(guān)，讓水緩緩流出，在吸附劑下沉的同時，可用橡皮塞對稱輕輕敲擊色譜柱，使吸附劑裝填均勻。待液面降至吸附劑頂部1厘米處時，關(guān)住下口，量取流出體積，求出柱內(nèi)保留體積，并以此確定開始收集洗脫液的時間。然后依次用100ml 95%乙醇和150ml蒸餾水按4-5ml/min的流速過柱，待最后通過柱的蒸餾水在吸附劑上端約1厘米時，關(guān)住下口，上樣。 請問，柱內(nèi)保留體積和收集洗脫液的時間有什么關(guān)系？、 進行梯度洗脫時，每個梯度洗脫液一般是2到三倍柱體積。那么，柱內(nèi)保留體積和柱體積有什么區(qū)別？、 謝謝��！ |
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2樓2012-02-18 16:29:32
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xiaoxiao270(金幣+1): 3Q 2012-02-25 19:58:38
nam2009(金幣+2): 2012-02-28 18:20:02
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3樓2012-02-25 19:21:31
123230683
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