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nam2009金蟲 (小有名氣)
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[求助]
聚酰胺柱內(nèi)的保留體積與柱體積的區(qū)別
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小生在看實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)時(shí)有些疑問,請(qǐng)給以指導(dǎo)。 實(shí)驗(yàn)操作如下 裝柱:稱取色譜用聚酰胺6克,置200ml燒杯中,加蒸餾水100ml輕輕搖勻,放置過夜,使之充分膨脹。裝柱前輕輕攪動(dòng)并傾去上層混濁液,下層再加蒸餾水復(fù)洗兩次(注意計(jì)算水量,以計(jì)算柱內(nèi)保留體積)。將洗好的聚酰胺連水一次倒入已處理好的柱內(nèi),打開下口開關(guān),讓水緩緩流出,在吸附劑下沉的同時(shí),可用橡皮塞對(duì)稱輕輕敲擊色譜柱,使吸附劑裝填均勻。待液面降至吸附劑頂部1厘米處時(shí),關(guān)住下口,量取流出體積,求出柱內(nèi)保留體積,并以此確定開始收集洗脫液的時(shí)間。然后依次用100ml 95%乙醇和150ml蒸餾水按4-5ml/min的流速過柱,待最后通過柱的蒸餾水在吸附劑上端約1厘米時(shí),關(guān)住下口,上樣。 請(qǐng)問,柱內(nèi)保留體積和收集洗脫液的時(shí)間有什么關(guān)系?、 進(jìn)行梯度洗脫時(shí),每個(gè)梯度洗脫液一般是2到三倍柱體積。那么,柱內(nèi)保留體積和柱體積有什么區(qū)別?、 謝謝!! |

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銀蟲 (小有名氣)

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