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mumiancc新蟲 (初入文壇)
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[求助]
關(guān)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)是否必須要除鹽和蛋白質(zhì)透析的問題
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| 請(qǐng)教下各位，我現(xiàn)在用0.01M PH7.2 Tris-Hcl緩沖液粗提的蛋白想要做細(xì)胞活性實(shí)驗(yàn)，想問下是否要將Tris-Hcl緩沖鹽除去呢？如果除去我用透析的方法可行嗎？如果透析的話，透析液直接用去離子水可以嗎？透析后凍干，再用細(xì)胞培養(yǎng)基溶解，再做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，這樣做合理嗎？剛剛開始做實(shí)驗(yàn)，很暈，先謝謝各位了 |
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【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
silicare(金幣+1): 謝謝參與 2012-02-20 12:39:48
silicare(金幣+1): 謝謝參與 2012-02-20 12:39:48
| 這個(gè)不懂，個(gè)人理解如下僅供參考：Tris-Hcl在蛋白純化時(shí)提供的是相對(duì)穩(wěn)定的pH，PBS模擬的是生理狀態(tài)下的鹽濃度和滲透壓。如果不透析，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果與預(yù)期實(shí)驗(yàn)相符，能說的過去；如果差別較大，troubleshooting時(shí)，是因?yàn)門ris-Hcl呢？還是因?yàn)榈鞍妆旧砟�？不易判斷。�?xì)胞在傳代時(shí)也常用PBS洗滌，綜上，個(gè)人意見是PBS透析。 |
2樓2012-02-19 13:39:22
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mumiancc7樓2012-02-20 08:13:27
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8樓2012-02-28 09:40:55
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10樓2012-02-28 16:07:30
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