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[求助]
DNA合成單如何解讀？請教！
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圖片給出了DNA合成單： 想了解ug per OD 和 nmols per OD 的量是怎么計(jì)算的？ DNA修飾后還能不能用260nm波長的吸光度進(jìn)行DNA的定量的分析？修飾后的基團(tuán)如果在該區(qū)域沒有是不是就可以。濃度怎么計(jì)算？ 請教高手�。�！ DNA 合成單 [ Last edited by weili100 on 2012-2-21 at 10:10 ] |
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weili100(金幣+3): ★有幫助 2012-02-25 13:22:15
weili100(金幣+3): ★有幫助 2012-02-25 13:22:15
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用紫外分光光度計(jì)在260nm波長測定溶液的吸光度來定量，請注意紫外分光光度計(jì)的使用，測定時(shí)溶液的吸光度最好稀釋到0.2-0.8之間(吸光度太高或太低會(huì)有較大的誤差)。DNA干粉用一定體積的水充分振蕩溶解以后，取部分溶液稀釋到1ml并在1ml標(biāo)準(zhǔn)比色皿中測定其吸光度，即為所測體積的OD值，進(jìn)而可以計(jì)算出母液的OD值。 舉例：您拿到一管干粉的DNA，用1ml水溶解成母液，取該母液50μL稀釋成1ml并在1ml標(biāo)準(zhǔn)比色杯中測定的吸光度為0.25，說明該50μL中含有0.25OD的DNA，也即說明原來1ml母液中含有5OD的DNA 你說的ug per OD 和 nmols per OD 的量計(jì)算，用（8.4nmol/1000）*4500.90就是了。 OD值是測出來的，不同的DNA分子量不同，好像純粹理論計(jì)算搞不出來。對于你的第二個(gè)問題：260nm是所有DNA的共有的吸收峰，修飾以后還能不能在這個(gè)波長下作檢測，很難說的。修飾后有影響肯定不行，沒有影響的話應(yīng)該還可以，但是要考慮仔細(xì)了，我以前用DNA修飾納米粒子作解鏈溫度。 |
4樓2012-02-24 11:39:10
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