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panpan3209金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
抗體非特異性結(jié)合
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類似ELISA法，通過(guò)二抗與抗體的結(jié)合檢測(cè)溶液中物質(zhì)，二抗吸附于NC膜上。但發(fā)現(xiàn)抗體與另一譜帶的親和素類蛋白物質(zhì)發(fā)生非特異性結(jié)合，溶液中BSA、吐溫均含少量，但非特異性結(jié)合仍存在。請(qǐng)問(wèn)各位大俠，如何能減弱其非特異性結(jié)合？最好是在不影響特異性目的結(jié)合的條件下。因還需給出較好的檢測(cè)信號(hào)值。 非常感謝�。�！  [ Last edited by panpan3209 on 2012-2-22 at 09:36 ] |
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2樓2012-02-22 10:30:22
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6樓2012-02-22 14:55:17
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panpan3209(金幣+3): 2012-02-23 08:49:08
panpan3209(金幣+3): 2012-02-23 08:49:08
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"親合素又稱卵白蛋白或抗生物素，分子量為68000，pI 10～10.5;親和素的高pI及高含糖結(jié)構(gòu)導(dǎo)致在聚苯乙烯板和硝酸纖維素膜上或與組織細(xì)胞DNA結(jié)合時(shí)，易產(chǎn)生一定程度的非特異性結(jié)合，造成較高的顯色背景;鏈霉親和素等電點(diǎn)更接近中性（pI=5~6），且不含糖基側(cè)鏈,鏈親和素在應(yīng)用中明顯克服了親和素的這一缺點(diǎn)." (引自網(wǎng)絡(luò)) 你用的是親和素還是鏈霉親和素呢? |
7樓2012-02-22 21:10:34
panpan3209
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9樓2017-07-22 15:15:02
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