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影響HPLC分離度的各種因素，并說明如何提高分離度
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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
逃跑熊S(金幣+2): 謝謝啦~~~~ 2012-02-24 17:47:33
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
逃跑熊S(金幣+2): 謝謝啦~~~~ 2012-02-24 17:47:33
百度查的：色譜的基本原理可以說是因為組分的極性不同,通過不同的固定相的時候在固定相上吸附能力不相同,那么改變固定相的極性或者流動相的極性就是最簡單的辦法(HPLC中固定相和流動相是競爭的關(guān)系).  另外可以參考一下這個網(wǎng)站上有詳細(xì)介紹，不知道是不是樓主MM需要的，《安捷倫醫(yī)藥與生化技術(shù)》第20期，網(wǎng)址如下： http://www.chem.agilent.com/cag/ ... _20_A3_eclipse.html |
7樓2012-02-24 09:19:33
2樓2012-02-22 17:11:26
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小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
逃跑熊S(金幣+1): 分離度：R=√n/4×(a-1)/a×k2/(1+k2)不是這個么？ 2012-02-22 17:34:13
soundhorizo(金幣+1): 感謝專業(yè)指導(dǎo) ^^ 歡迎常來 2012-02-22 18:06:59
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包，謝謝回帖
逃跑熊S(金幣+1): 分離度：R=√n/4×(a-1)/a×k2/(1+k2)不是這個么？ 2012-02-22 17:34:13
soundhorizo(金幣+1): 感謝專業(yè)指導(dǎo) ^^ 歡迎常來 2012-02-22 18:06:59
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分離度的公式是： R=2(tR2-tR1)/(W1+W2) 你可以通過加大兩個保留時間之差再提高。 通過選擇合適的固定相達(dá)到提高分離度的效果，同時在改變流動相組分比例也能提高分離效果。 2. 離子對試劑是其中的一個手段 3. 不同樣品改變不同參數(shù)如改變PH值、換柱子、降低進(jìn)樣量、降低流速、柱溫等具體問題具體分析 4. 改變洗脫劑的比例等 5. 增加柱溫也是一個方面。 6. 看了大家的討論，談幾點(diǎn)意見吧。 1）從理論上說可以通過降低塔板高度以及增加相對保留時間兩個方面來實(shí)現(xiàn)。 2）在液相色譜實(shí)踐中，色譜柱的分離效能雖然可以通過更換高效色譜柱、調(diào)整最佳流速等手段來控制，但更多情況下還是保留時間的調(diào)整更為來的方便。 3）改變相對保留時間（選擇性）的常用手段至少包括：流動相配比、pH值、離子對試劑、柱溫度等方面。這些要根據(jù)自己關(guān)注的難分離組分對的具體情況有選擇的實(shí)施，所以，必須首先了解它們之間化學(xué)性質(zhì)的差異，然后有針對地選擇處理手段。 4）液相色譜分析的目標(biāo)成分往往比較復(fù)雜，常涉及多種成分同時檢測，所以在做分析條件的調(diào)整時必須同時兼顧所有主要成分色譜行為的變化，其中既包括目標(biāo)成分，也包括共存的干擾成分。 所以，要想保證所有目標(biāo)成分在任何樣品中都能獲得滿意的分離度，這是一個十分富有挑戰(zhàn)性的課題，即便一個經(jīng)驗十分豐富的色譜工作者同樣也不敢輕視。 7. 我們常用的C18柱，一般載碳量高的固定相，分離效果要強(qiáng)一點(diǎn)。有時碰到分離效果不好時，多采用更換色譜柱（不同品牌）的方法，這樣避免了再去摸索其他條件而耗費(fèi)時間，能少改動盡量少該，方法定下了盡量不去動它 |
3樓2012-02-22 17:31:43
4樓2012-02-22 17:35:31
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