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lxx071217銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
蛋白提取中的沉淀是什么？
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目前在提取蛋白時出現(xiàn)了些問題，希望能得到大家的幫助。 我用的是ripa裂解液，加了蛋白酶抑制劑，將貼壁細胞刮下來，冰上繼續(xù)裂解，期間vortex幾次，最后12,000gx10min ;此時分別取上清和沉淀加入loading buffer煮沸5min，上樣做WB。發(fā)現(xiàn)上清和沉淀中均有目的條帶。現(xiàn)想咨詢：離心后的沉淀是什么成分？（細胞核？碎片？還是不溶性蛋白）；如果是不溶性的蛋白加了loading buffer煮沸就可以電泳做WB了嗎？如果我想檢測全細胞的蛋白，不分可溶性和不溶性，應(yīng)該怎么做呢？ |
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木蟲 (正式寫手)
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4樓2012-02-27 20:08:51
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