 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 2242 | 回復(fù): 12 | ||
[求助]
雙酶切
|
||
| 我的片段與質(zhì)粒連接后，轉(zhuǎn)到DH5α中，后提質(zhì)粒，進(jìn)行雙酶切驗(yàn)證，和PCR驗(yàn)證，PCR能出現(xiàn)目的條帶，可是雙酶切切不來(lái)是怎么回事呢？不解，請(qǐng)大家多多指教啊 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有136人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線(xiàn)
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專(zhuān)業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木(金幣+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-02-29 08:19:28
yeshui(金幣+2): ★有幫助 2012-02-29 20:45:43
小丹木木(金幣+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2012-02-29 08:19:28
yeshui(金幣+2): ★有幫助 2012-02-29 20:45:43
|
可能是假陽(yáng)性，即在涂布的時(shí)候，將殘留的為整合入載體的目的基因遺留在平板上（實(shí)際上這種可能性非常大），在挑去菌落的時(shí)候，將殘留基因一同帶入PCR體系中，由于PCR的高靈敏度，自然會(huì)出現(xiàn)目的條帶。 建議重新設(shè)計(jì)一對(duì)鑒定引物，5'端為目的基因上游質(zhì)粒上的一段序列，3'端為原來(lái)目的基因的3‘端，這樣能有效鑒定出攜帶目的基因的克隆 |
8樓2012-02-29 06:51:09
panda73
金蟲(chóng) (小有名氣)
- MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 80 (初中生)
- 金幣: 1201.3
- 散金: 44
- 紅花: 2
- 帖子: 191
- 在線(xiàn): 42.5小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 985964
- 注冊(cè): 2010-03-30
- 性別: GG
- 專(zhuān)業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
yeshui2樓2012-02-27 21:43:34
小丹木木
榮譽(yù)版主 (著名寫(xiě)手)
- MolEPI: 2
- 應(yīng)助: 26 (小學(xué)生)
- 貴賓: 1.999
- 金幣: 6801.7
- 散金: 1553
- 紅花: 35
- 沙發(fā): 2
- 帖子: 1489
- 在線(xiàn): 743.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1272639
- 注冊(cè): 2011-04-21
- 性別: MM
- 專(zhuān)業(yè): 疫苗學(xué)
- 管轄: 分子生物
3樓2012-02-28 08:16:42
4樓2012-02-28 08:49:50
5樓2012-02-28 10:39:33
shangyufang
木蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 7 (幼兒園)
- 金幣: 3143.4
- 散金: 18
- 紅花: 12
- 帖子: 251
- 在線(xiàn): 140.3小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1127979
- 注冊(cè): 2010-10-20
- 專(zhuān)業(yè): 環(huán)境微生物學(xué)
6樓2012-02-28 22:15:40
smilerion
銀蟲(chóng) (初入文壇)
- 應(yīng)助: 14 (小學(xué)生)
- 金幣: 239.8
- 帖子: 44
- 在線(xiàn): 22.8小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 968212
- 注冊(cè): 2010-03-11
7樓2012-02-28 23:45:27
9樓2012-02-29 20:42:48
10樓2012-02-29 20:47:03
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 yeshui 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
