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fannyzehong銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
溶菌酶制備及如何破碎細(xì)菌細(xì)胞壁
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老師要我用溶菌酶破碎細(xì)胞壁，顯微觀察無細(xì)胞壁的細(xì)菌內(nèi)部結(jié)構(gòu)等等。請(qǐng)教下，這樣的溶菌酶怎么配制？濃度？破碎細(xì)胞壁的步驟？越詳細(xì)越好，謝謝了！ |
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j2
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4樓2012-02-29 09:46:36
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2樓2012-02-28 11:11:04
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我用溶菌酶做過大腸桿菌破壁（用于純化蛋白）。當(dāng)時(shí)用的濃度是4mg/mL，buffer是50mM Tris-HCl（pH 8.0），50mM Glucose，1mM EDTA，室溫放置15分鐘。 你想制備原生質(zhì)體，可能buffer的滲透壓要注意點(diǎn)，去壁的時(shí)候可以隔一段時(shí)間取一點(diǎn)來鏡檢。 |
5樓2012-02-29 10:29:43
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