 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 1806 | 回復(fù): 10 | ||
qingtingzhe銀蟲 (正式寫手)
步行者
|
[求助]
請教二維電泳高手，如回答的好，另有重賞！�。�！
|
|
我現(xiàn)在做一株紅球菌二維電泳，研究其受多環(huán)芳烴誘導(dǎo)的差異蛋白，通過差異蛋白尋找降解多環(huán)芳烴的降解基因�，F(xiàn)在遇到一些問題： （1）超聲破碎的功率和時間選擇。由于紅球菌是革蘭氏陽性菌，破壁比較難，條件怎樣選擇？ （2）影響蛋白樣品制備的因素有哪些？有哪些注意事項，例如怎么除鹽，怎么盡量減少蛋白的損失。 （3）下面是我從文獻(xiàn)中看到的方法，請?zhí)嵝┙ㄗh： （1）收集菌體。 （2）超聲破碎。 （3）除去細(xì)胞碎屑和DNA。通過一步加入精胺，290000g高速離心。 （4）通過透析除去無機(jī)鹽和小分子物質(zhì)。 （5）-20度保存。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
考研求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
085601專碩，總分342求調(diào)劑，地區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
085601材料工程專碩求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
一志愿天津大學(xué)化學(xué)工藝專業(yè)（081702）315分求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
能源材料化學(xué)課題組招收碩士研究生8-10名
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
296求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
0703化學(xué)調(diào)劑 ，六級已過，有科研經(jīng)歷
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
268求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
材料，紡織，生物（0856、0710），化學(xué)招生啦
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
301求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 反轉(zhuǎn)錄之后PCR擴(kuò)增片段問題的請教，急急急
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 請教一下稱對照品的操作方法 。。。。。
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 請問哪位高手用瓊脂糖電泳跑過蛋白？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 請教大家關(guān)于雙向電泳的問題~
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 求高手幫我分析下 PCR 實驗電泳圖，怎么改善！�。�
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 求高手指點(diǎn)RNA電泳圖~~~~
已經(jīng)有25人回復(fù)
- 請教高手 電泳為什么是蛋白質(zhì)小分子跑在最下面
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 請教分析RNA電泳圖
已經(jīng)有10人回復(fù)
- ganssian新手，請教高手�？凑l能回答我這個問題
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 哪位高手幫我看看我的DNA電泳圖
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助】請問各位高手 毛細(xì)管電泳的電滲流如何測定�。�
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】請教瓊脂糖凝膠電泳問題
已經(jīng)有18人回復(fù)
xhjggl
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 43 (小學(xué)生)
- 金幣: 2889.3
- 散金: 150
- 紅花: 7
- 帖子: 556
- 在線: 190.9小時
- 蟲號: 95496
- 注冊: 2005-10-04
- 性別: GG
- 專業(yè): 蛋白質(zhì)組學(xué)
2樓2011-07-06 00:16:21
yangqi
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1627.5
- 散金: 180
- 帖子: 106
- 在線: 82小時
- 蟲號: 1203783
- 注冊: 2011-02-15
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
3樓2011-07-06 09:42:42
qingtingzhe
銀蟲 (正式寫手)
步行者
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1218.9
- 散金: 271
- 紅花: 3
- 帖子: 410
- 在線: 75.1小時
- 蟲號: 1188203
- 注冊: 2011-01-12
- 性別: GG
- 專業(yè): 病毒學(xué)
4樓2011-07-07 09:36:16
superboring
鐵蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 20.5
- 帖子: 11
- 在線: 3.8小時
- 蟲號: 947125
- 注冊: 2010-01-23
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
5樓2011-07-07 16:12:02
yangqi
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1627.5
- 散金: 180
- 帖子: 106
- 在線: 82小時
- 蟲號: 1203783
- 注冊: 2011-02-15
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
qingtingzhe(金幣+20): 幫助挺大的 2011-07-07 21:04:11
|
不用說請教，呵呵，我做得也不是很多。 1.超聲時間間隔十分鐘，冰上超聲。但是效果不是很好，可能我做的細(xì)菌壁太厚。最近準(zhǔn)備用溶菌酶試試。 2.沒有用過超速離心，我一般是13200r離心30min。好像超速離心機(jī)可以做不同蛋白的分級，我以前本來打算做細(xì)胞膜蛋白，就需要超速離心機(jī)。 3.透析可以除鹽，還可以純化，但是如果蛋白量本來不大，損耗是比較大的。當(dāng)然純度會比丙酮沉淀的高一些。要不你加大提取的量，透析之后，用冷凍干燥離心的方法減少體積，這樣可以提高濃度。PS：我也沒用過透析，師兄師姐都不建議用。 4.另外，打算跑雙向的話，建議先用核酸酶處理下，防止橫條紋的產(chǎn)生。 提蛋白時，整個過程保持低溫、注意添加蛋白酶抑制劑....... 不然全降解完了。 |
6樓2011-07-07 16:27:03
qingtingzhe
銀蟲 (正式寫手)
步行者
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1218.9
- 散金: 271
- 紅花: 3
- 帖子: 410
- 在線: 75.1小時
- 蟲號: 1188203
- 注冊: 2011-01-12
- 性別: GG
- 專業(yè): 病毒學(xué)
7樓2011-07-07 21:00:14
qingtingzhe
銀蟲 (正式寫手)
步行者
- 應(yīng)助: 1 (幼兒園)
- 金幣: 1218.9
- 散金: 271
- 紅花: 3
- 帖子: 410
- 在線: 75.1小時
- 蟲號: 1188203
- 注冊: 2011-01-12
- 性別: GG
- 專業(yè): 病毒學(xué)
8樓2011-07-07 21:24:49
yangqi
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1627.5
- 散金: 180
- 帖子: 106
- 在線: 82小時
- 蟲號: 1203783
- 注冊: 2011-02-15
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
9樓2011-07-08 09:06:33
yangqi
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 1627.5
- 散金: 180
- 帖子: 106
- 在線: 82小時
- 蟲號: 1203783
- 注冊: 2011-02-15
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
10樓2011-07-08 09:07:25
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 qingtingzhe 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 341求調(diào)劑 +5 | 搗蛋豬豬 2026-03-11 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 【0856】化學(xué)工程（085602）313 分，本科學(xué)科評估A類院�；瘜W(xué)工程與工藝，誠求調(diào)劑 +7 | 小劉快快上岸 2026-03-11 | 8/400 |
|
|
[考研] 26考研求調(diào)劑 +6 | 丶宏Sir 2026-03-13 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 梁成偉老師課題組歡迎你的加入 +8 | 一鴨鴨喲 2026-03-14 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +3 | lemonzzn 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[文學(xué)芳草園] 伙伴們，祝我生日快樂吧 +17 | myrtle 2026-03-10 | 26/1300 |
|
|
|
[考研] 070303 總分349求調(diào)劑 +3 | LJY9966 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 材料與化工一志愿南昌大學(xué)327求調(diào)劑推薦 +7 | Ncdx123456 2026-03-13 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0703 物理化學(xué)調(diào)劑 +3 | 我可以上岸的對?/a> 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[教師之家] 焦慮 +7 | 水冰月月野兔 2026-03-13 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料專碩288分求調(diào)劑 一志愿211 +4 | 在家想你 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +3 | zjy101327 2026-03-11 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 337一志愿華南理工0805材料求調(diào)劑 +7 | mysdl 2026-03-11 | 9/450 |
|
|
|
[考研] ［0860］321分求調(diào)劑，ab區(qū)皆可 +4 | 寶貴熱 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] （081700）化學(xué)工程與技術(shù)-298分求調(diào)劑 +12 | 11啦啦啦 2026-03-11 | 35/1750 |
|
|
|
[考研] 26調(diào)劑/材料科學(xué)與工程/總分295/求收留 +9 | 2026調(diào)劑俠 2026-03-12 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +7 | 18880831720 2026-03-11 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +8 | 困于星晨 2026-03-12 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 工科調(diào)劑 +4 | Jiang191123！ 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[論文投稿]
投稿問題
 5+4
|
星光燦爛xt 2026-03-12 | 6/300 |
|