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qingtingzhe銀蟲(chóng) (正式寫手)
步行者
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[求助]
請(qǐng)教二維電泳高手，如回答的好，另有重賞！�。�！
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我現(xiàn)在做一株紅球菌二維電泳，研究其受多環(huán)芳烴誘導(dǎo)的差異蛋白，通過(guò)差異蛋白尋找降解多環(huán)芳烴的降解基因�，F(xiàn)在遇到一些問(wèn)題： （1）超聲破碎的功率和時(shí)間選擇。由于紅球菌是革蘭氏陽(yáng)性菌，破壁比較難，條件怎樣選擇？ （2）影響蛋白樣品制備的因素有哪些？有哪些注意事項(xiàng)，例如怎么除鹽，怎么盡量減少蛋白的損失。 （3）下面是我從文獻(xiàn)中看到的方法，請(qǐng)?zhí)嵝┙ㄗh： （1）收集菌體。 （2）超聲破碎。 （3）除去細(xì)胞碎屑和DNA。通過(guò)一步加入精胺，290000g高速離心。 （4）通過(guò)透析除去無(wú)機(jī)鹽和小分子物質(zhì)。 （5）-20度保存。 |
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yangqi
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5樓2011-07-07 16:12:02
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