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keennes木蟲 (著名寫手)
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[交流]
研究細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，建立細(xì)胞系，是否一定要敲出細(xì)胞內(nèi)源性蛋白分子？ 已有2人參與
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本人從事細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的研究，需要建立一個新細(xì)胞系，用EGFP標(biāo)記某一蛋白分子，以監(jiān)測該蛋白涉及到的信號途徑的信號傳遞情況。我的建議是：敲出細(xì)胞內(nèi)源性的該蛋白，通過表達(dá)構(gòu)建載體在細(xì)胞表達(dá)EGFP與該蛋白的融合蛋白，達(dá)到精確定量測定信號強弱的目的。但是導(dǎo)師和其他人不同意，認(rèn)為沒有必要。我也就按照他們的意見來做，但我給導(dǎo)師明確說了保留我的意見。后來出了問題，信號果然很弱；增加幾倍的激動劑，仍然很弱。但他們?nèi)匀徽J(rèn)為敲出內(nèi)源性蛋白沒有必要。我很迷茫啊，請牛人給個建議。謝謝了先。 [ 來自科研家族 生物醫(yī)藥家族 ] |
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