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wanghuiyanyx
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[求助]
RNA樣品中的未除盡基因組DNA
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用Qiagen小提試劑盒（包括柱子上DNaseI處理過程）提取細(xì)菌RNA用于芯片，電泳看不到基因組條帶，但是以此樣品作為模板進(jìn)行PCR，卻可以擴增出目的片段！這樣的樣品是否還需要再進(jìn)行DNaseI處理？但是擔(dān)心這樣再處理一遍會導(dǎo)致樣品被稀釋，且RNA純度受影響。請高手指教！ [ Last edited by wanghuiyanyx on 2012-2-28 at 22:08 ] |
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wanghuiyanyx 
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9樓2012-03-08 13:53:38
【答案】應(yīng)助回帖
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
小丹木木(金幣+2): 還是很熱心哦 2012-02-29 10:00:19
wanghuiyanyx(金幣+20): ★★★很有幫助 2012-02-29 10:36:27
小丹木木(金幣+2): 還是很熱心哦 2012-02-29 10:00:19
wanghuiyanyx(金幣+20): ★★★很有幫助 2012-02-29 10:36:27
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用于芯片估計對DNA污染要求很高吧？ 個人經(jīng)驗：柱上消化效率不如在溶液體系里加DNase I消化。 既然你都提出來RNA了只能再進(jìn)行DNaseI消化處理一次咯，當(dāng)然，消化處理后用柱子或氯仿抽提一次即可不必?fù)?dān)心純度及濃度的問題（亦可去掉DNaseI）。不過你需要擔(dān)心的是操作得非常謹(jǐn)慎注意，切勿到時把DNA消化干凈了，RNA也跟著去了... 祝好！ |
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wanghuiyanyx
2樓2012-02-29 09:16:13
wanghuiyanyx
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3樓2012-02-29 10:21:51
4樓2012-02-29 10:50:35
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