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cc-tangjie金蟲 (正式寫手)
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[求助]
使用酶聯(lián)免疫法遇到的問題
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| 使用酶聯(lián)免疫法做人體血樣中抗體的測定時(shí)兩次做出來的結(jié)果不一樣,一次陽性一次陰性,兩次該加的都加了的,第一次是晚上做的第二次是第二天下午做的??? |
木蟲 (正式寫手)
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1,ELISA法的靈敏度較高,但是缺點(diǎn)是其酶的純度和反應(yīng)過程易受環(huán)境因素影響,使其穩(wěn)定性和重復(fù)性較差,因而易于造成漏檢和假陽性。當(dāng)抗原抗體濃度過高時(shí),也可以因hock效應(yīng)造成假陰性。 2,采集樣本的試管也有影響,塑料試管能吸附抗原物質(zhì),樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性,最好使用一次性玻璃試管或真空管采血管;并使用非抗凝標(biāo)本,肝素抗凝血漿會(huì)增加OD值,可能與高濃度肝素具有強(qiáng)大的負(fù)電荷能吸附酶標(biāo)記物不易洗脫有關(guān);EDTA鈉或鉀鹽、酶抑制劑(如NaN3)可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性。 3,加樣吸嘴的潔凈與否和吸量的準(zhǔn)確性,直接影響檢測結(jié)果。溫浴影響。冼滌影響。 |
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