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梁小云632新蟲 (初入文壇)
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[求助]
熒光定量PCR CT值很高怎么辦??
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Sample Text各位前輩我在做qPCR,用的是ABI7900機(jī)子,試劑盒是羅氏13850001.。 在做qPCR前做過普通PCR,擴(kuò)增得很好,帶很亮,也無雜帶 我做了5個基因,1個Actin和4個目的基因,3個模板,96孔板,25微升體系,SYBR終濃度是1倍,cDNA原液、稀釋10倍、稀釋20倍分別加入2.5微升(cDNA是用invitrogen試劑盒合成的) qPCR結(jié)果是Actin的CT值很高,未稀釋的為22-28之間,稀釋了的25-35左右,而且各個模板的CT值相差大。 目的基因的CT值也在25-35之間。 請問我這個問題應(yīng)該怎么解決????? |
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新蟲 (初入文壇)
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