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luocongqiang鐵蟲 (小有名氣)
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本人要要做魚類腸道微生物，但不知如何下手，請有經(jīng)驗的支招啊，本人無限感激
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本人要要做魚類腸道微生物，但不知如何下手，請有經(jīng)驗的支招啊，本人無限感激 首先不知道怎么從腸道中把樣品提取出來，第二小弟要做dgge要提DNA不知道用什么方法體好呢，最好小弟對于PCR中用到的引物一點也不明白啊，是需要自己設(shè)計嗎，還是通用的呀！ 各位有什么號的方法，文獻麻煩借鑒一下啊，小弟不吝感激之情 |
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
luocongqiang(金幣+4): 2012-03-03 09:40:12
luocongqiang(金幣+1): 2012-03-03 09:40:33
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luocongqiang(金幣+1): 2012-03-03 09:40:33
| 我做的就是微生物，你得先取魚腸道一節(jié)，用接種環(huán)（類似可以用細(xì)鐵絲頂端彎一個小圈，燒紅晾涼了后）刮取魚腸道內(nèi)壁和腸道食物糜，加入盛有滅菌后的5ml無菌水的試管中，震蕩搖勻后制成菌懸液，靜置3min后用無菌吸管吸取上清液，點在培養(yǎng)基平板上，用灼燒過后晾涼了的"了"字形細(xì)玻璃棒涂布在平板上，以上操作必須全部在超凈工作臺內(nèi)酒精燈火焰上方，如果沒有條件，那就在相對干凈的塑料箱內(nèi)操作，使用之前要用75%的酒精消毒滅菌，涂布完畢后，將平板正放在37度無氧條件下的培養(yǎng)箱內(nèi)，因為是腸道菌都是厭氧的細(xì)菌。。一般過夜就可以看到菌落長出，應(yīng)及時轉(zhuǎn)接出去，并做好標(biāo)記，注意無菌操作。。。。。 |
2樓2012-03-03 01:39:23
luocongqiang
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