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jasmineqjj銅蟲 (小有名氣)
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求助各位，總黃酮含量測定方法用比色法和HPLC哪個(gè)更合適呢？
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shian
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【答案】應(yīng)助回帖
★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
豆哥(金幣+1): 謝謝參與 2012-03-09 10:29:38
xiaoxiao270(PhEPI+1): 很好的回答 2012-03-11 20:39:02
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
豆哥(金幣+1): 謝謝參與 2012-03-09 10:29:38
xiaoxiao270(PhEPI+1): 很好的回答 2012-03-11 20:39:02
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HPLC測總黃酮是有先例的，國外文獻(xiàn)有報(bào)道。 基本原理：利用黃酮類物質(zhì)的共性，存在兩個(gè)特征吸收峰，一個(gè)在280nm左右，一個(gè)在340nm左右；從而判斷HPLC圖譜上出的各峰是否屬于黃酮類化合物；把屬于黃酮類化合物的峰的峰面積算總和，即為總黃酮峰面積，與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（可根據(jù)實(shí)際情況選擇結(jié)構(gòu)類似黃酮做為對(duì)照品）峰面積換算而得總黃酮含量。 前提：HPLC的檢測器為DAD檢測器，能對(duì)每個(gè)出峰進(jìn)行全波長吸收掃描。 |
11樓2012-03-09 10:11:23
wxs501
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7樓2012-03-07 20:15:32
shian
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【答案】應(yīng)助回帖
★
xiaoxiao270(金幣+1): 3Q 2012-03-11 20:38:37
xiaoxiao270(金幣+1): 3Q 2012-03-11 20:38:37
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具體實(shí)例可參考： Zeraik等采用的方法 HPLC法，根據(jù)黃酮類化合物的共性（在230-280nm處，以及300-350nm處分別各有一個(gè)最大吸收峰），將樣品進(jìn)行RP-HPLC-UV/DAD分析，選擇在上述兩段波長處有最大吸收峰的色譜峰（推定為黃酮化合物），將它們?cè)?30nm波長下檢測到的峰面積疊加作為總黃酮的峰面積，以蘆丁作為對(duì)照品，采用外標(biāo)法計(jì)算總黃酮的含量。 參考文獻(xiàn)： Zeraik, M. L. and J. H. Yariwake. Quantification of isoorientin and total flavonoids in Passiflora edulis fruit pulp by HPLC-UV/DAD[J]. Microchem J.,2010,96(1): 86-91. |
12樓2012-03-09 10:29:30
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