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jasmineqjj銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助各位,總黃酮含量測定方法用比色法和HPLC哪個更合適呢?
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| 求助各位,總黃酮含量測定方法用比色法和HPLC哪個更合適呢? |
總黃酮 |

至尊木蟲 (著名寫手)
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HPLC測總黃酮是有先例的,國外文獻(xiàn)有報道。 基本原理:利用黃酮類物質(zhì)的共性,存在兩個特征吸收峰,一個在280nm左右,一個在340nm左右;從而判斷HPLC圖譜上出的各峰是否屬于黃酮類化合物;把屬于黃酮類化合物的峰的峰面積算總和,即為總黃酮峰面積,與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(可根據(jù)實際情況選擇結(jié)構(gòu)類似黃酮做為對照品)峰面積換算而得總黃酮含量。 前提:HPLC的檢測器為DAD檢測器,能對每個出峰進(jìn)行全波長吸收掃描。 |

鐵桿木蟲 (著名寫手)
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具體實例可參考: Zeraik等采用的方法 HPLC法,根據(jù)黃酮類化合物的共性(在230-280nm處,以及300-350nm處分別各有一個最大吸收峰),將樣品進(jìn)行RP-HPLC-UV/DAD分析,選擇在上述兩段波長處有最大吸收峰的色譜峰(推定為黃酮化合物),將它們在330nm波長下檢測到的峰面積疊加作為總黃酮的峰面積,以蘆丁作為對照品,采用外標(biāo)法計算總黃酮的含量。 參考文獻(xiàn): Zeraik, M. L. and J. H. Yariwake. Quantification of isoorientin and total flavonoids in Passiflora edulis fruit pulp by HPLC-UV/DAD[J]. Microchem J.,2010,96(1): 86-91. |

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