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zhyvyv木蟲 (正式寫手)
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[求助]
關(guān)于一個載體pGZRS-38的XbaI&SacI雙酶切的問題
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大家好，現(xiàn)遇到這樣一個問題：載體pGZRS-38用Fermentas 快速內(nèi)切酶XbaI&SacI雙酶切總是感覺切不開，酶切完后還是有三條帶，但中間一條會亮一些，也曾做過分別單酶切，電泳結(jié)果類似。也曾對該載體的多克隆位點測序，來自pUC-18，測序結(jié)果正確�；厥针p酶切的中間的亮帶，連接后長出的都是些空載菌，而且不知為啥酶切后電泳觀察感覺質(zhì)粒損失很嚴(yán)重，回收的效率非常低。因為XbaI的作用受甲基化影響，所以也購買了全式金去甲基化的E. coli感受態(tài)，重新轉(zhuǎn)化質(zhì)粒，提取質(zhì)粒，該問題也未得到改善。拜托各位幫我分析一下是什么原因！非常感謝！ pGZRS-38 Xbal&SacI雙酶切，Marker為DL5000 |
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susizheng
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6樓2013-07-05 08:52:14
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