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thanku0967金蟲 (初入文壇)
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cck8測細(xì)胞增殖是標(biāo)準(zhǔn)曲線是怎么繪制的？
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| cck8測細(xì)胞增殖的標(biāo)準(zhǔn)曲線是怎么繪制的？是用已知的不同細(xì)胞數(shù)測相應(yīng)的OD值然后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線？如果是這樣小弟有個(gè)疑問，為何不直接數(shù)細(xì)胞數(shù)來繪制生長曲線？ |
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thanku0967
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3樓2012-03-20 22:51:29
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【答案】應(yīng)助回帖
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感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
thanku0967: 金幣+10, ★有幫助 2012-03-20 22:53:02
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
thanku0967: 金幣+10, ★有幫助 2012-03-20 22:53:02
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用cck-8沒做過標(biāo)曲，就直接和control組比的。。。 但是我感覺應(yīng)該是用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后用CCK8反應(yīng)做出標(biāo)曲來，比如做10的3次方，10的4次方，10的5次方。。。到10的10次方~然后以細(xì)胞數(shù)為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的OD為縱坐標(biāo)，可以擬合出一條直線來。這樣，你后面實(shí)驗(yàn)時(shí)測定的OD值就可以直接在直線上找到。 如果用數(shù)細(xì)胞來繪制生長曲線工作量太大，也不準(zhǔn)。不如用標(biāo)曲的方便。但是用標(biāo)曲的話，每次實(shí)驗(yàn)時(shí)都要重新繪制，因?yàn)榧?xì)胞狀態(tài)啊之類的每次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)之間會(huì)有不一樣。 |
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2樓2012-03-20 16:06:31
freshblack
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【答案】應(yīng)助回帖
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thanku0967: 金幣+5, ★有幫助 2012-03-22 23:47:26
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你要做藥物刺激兩個(gè)周？這么久？ 那我感覺有兩個(gè)方法： 1，你種板的時(shí)候按十倍梯度稀釋，不要計(jì)數(shù)，在做標(biāo)曲的那天再進(jìn)行計(jì)數(shù)。 2，你做標(biāo)曲的細(xì)胞，在你測受試板OD的前一天再種板，第二天計(jì)數(shù)并作標(biāo)曲。 第一個(gè)方法可能比較準(zhǔn)些，畢竟是相同的細(xì)胞一次處理。 第二個(gè)方法不是同一批次處理的細(xì)胞，但是計(jì)數(shù)上可能準(zhǔn)點(diǎn)。 這也是我自己的想法，沒有運(yùn)用到實(shí)踐中。你要做實(shí)驗(yàn)的話可能要多做幾次摸摸條件，比如按方法一種板的話，初始細(xì)胞的濃度就很重要啦，自己要摸索一下~ |
4樓2012-03-21 19:23:07
freshblack
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【答案】應(yīng)助回帖
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thanku0967: 金幣+5 2012-03-22 23:47:37
thanku0967: 金幣+5 2012-03-22 23:47:37
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方法1再說詳細(xì)一些，因?yàn)槲覀�(gè)人感覺這個(gè)比較準(zhǔn)。 就比如10的3次方你計(jì)數(shù)好了，然后10倍10倍稀釋，最后稀釋到10的10次方，或者更稀一些。再或者以后經(jīng)驗(yàn)比較豐富了，可以直接10倍稀釋種稀一點(diǎn)。 然后你在測OD前再對它們計(jì)個(gè)數(shù)，再做標(biāo)曲。 總而言之，方法得靠自己摸索，別人講的也就是個(gè)概念~祝好運(yùn)啦~~ |
5樓2012-03-21 19:27:53
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