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caodetiankun

鐵蟲 (初入文壇)


[交流] Agilent HPLC 1200 的基線問題

Sample Text
我用Agilent HPLC1200,4.6*250mm SB-C18柱分離抗氧劑時,用磷酸水溶液/乙腈做流動相時,為什么基線呈波浪狀?沖了很久都那樣!然后換成乙腈/水或甲醇/水做流動相,基線又正常了。為什么呢?
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
樓主是用比例閥混合的溶劑還是混合好再用一個泵走的基線啊 可以先把兩種流動相按比例混合 再用單泵來走一下呢 可能會使基線平一點
6樓2012-03-19 19:05:16
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wfjbioon

鐵桿木蟲 (正式寫手)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
引用回帖:
6樓: Originally posted by lifucheng at 2012-03-19 19:05:16:
樓主是用比例閥混合的溶劑還是混合好再用一個泵走的基線啊 可以先把兩種流動相按比例混合 再用單泵來走一下呢 可能會使基線平一點

采用這種方法一般能解決問題。同時也可以再超聲處理下。
7樓2012-03-19 19:23:30
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hlxydd

木蟲 (小有名氣)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
兄弟,0.1M的濃度就是100mM濃度非常高了,如果是磷酸鹽,這個濃度肯定基線不穩(wěn)的,沒必要搞這么高濃度,還有波長一般210這種低波長才會基線不穩(wěn),如果254nm是沒有問題的。你的問題我分析了下:
1.可能是沒有在線脫氣機,氣泡產生。
2.如果流動相都超聲脫氣,那就是濃度問題,100mm的濃度太高,必須降低。
3.混合器質量不好,換成等度看看。
16樓2012-03-26 12:20:10
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普通回帖

yuh870519

新蟲 (初入文壇)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
會不會是磷酸鹽的濃度太大了?
2樓2012-03-18 23:51:46
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yuh870519

新蟲 (初入文壇)



soundhorizo: 金幣+1, 鼓勵應助,歡迎常來分析版指導交流 ^^ 2012-03-19 08:55:12
跟檢測波長也有關系。
3樓2012-03-18 23:56:20
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gwwgww5566

金蟲 (正式寫手)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
我做液質如果出現規(guī)律的波浪狀基線一般是泵里有氣泡,你這液相換了流動相后波浪狀消失說明應該不是儀器的問題,還是流動相的問題?梢哉{節(jié)一下濃度,沖的時間長點,要是一直是規(guī)律的波浪狀基線也可認為是穩(wěn)定狀態(tài)
4樓2012-03-19 13:05:56
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
樓主用純水相過渡了嗎,檢測波長是不是太低了?

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5樓2012-03-19 18:59:31
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MJF628

金蟲 (職業(yè)作家)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
多大的波浪,開空調了么
8樓2012-03-19 21:28:59
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caodetiankun

鐵蟲 (初入文壇)


引用回帖:
2樓: Originally posted by yuh870519 at 2012-03-18 23:51:46:
會不會是磷酸鹽的濃度太大了?

才0.1M
9樓2012-03-20 20:36:13
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caodetiankun

鐵蟲 (初入文壇)


引用回帖:
3樓: Originally posted by yuh870519 at 2012-03-18 23:56:20:
跟檢測波長也有關系。

但那是檢測物的最大吸收波長,必須在那個波長下檢測
10樓2012-03-20 20:37:30
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caodetiankun

鐵蟲 (初入文壇)


送鮮花一朵
引用回帖:
5樓: Originally posted by lifucheng at 2012-03-19 18:59:31:
樓主用純水相過渡了嗎,檢測波長是不是太低了?

要怎么過度。慷矣猛曛邮遣皇且矐^度?
11樓2012-03-20 20:39:05
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caodetiankun

鐵蟲 (初入文壇)


引用回帖:
6樓: Originally posted by lifucheng at 2012-03-19 19:05:16:
樓主是用比例閥混合的溶劑還是混合好再用一個泵走的基線啊 可以先把兩種流動相按比例混合 再用單泵來走一下呢 可能會使基線平一點

是兩個泵啊,問題是我要走梯度。
12樓2012-03-20 20:40:27
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caodetiankun

鐵蟲 (初入文壇)


引用回帖:
8樓: Originally posted by MJF628 at 2012-03-19 21:28:59:
多大的波浪,開空調了么

-5mAu到5mAu
13樓2012-03-20 20:41:19
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★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
soundhorizo: 金幣+2, 感謝應助,歡迎常來~ ^^ 2012-03-22 10:13:44
先按同比例的乙腈水沖柱作為過渡 然后再換成同比例的乙腈-磷酸沖柱 這樣會好一點 如果是梯度的話 確實比較麻煩 樓主能不能用三氟乙酸代替磷酸來作為流動相呢?
14樓2012-03-21 18:31:14
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呵呵zhuzhu

新蟲 (初入文壇)


★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
soundhorizo: 金幣+1, 感謝應助,歡迎常來~ ^^ 2012-03-22 10:13:33
換換檢測時用的餓流動相試試     
我用甲醇-緩沖鹽跑基線就是波浪狀,換成乙腈-緩沖鹽時就正常了~~
15樓2012-03-21 22:17:23
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pxh5262

木蟲 (初入文壇)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
通常來說基線呈波浪狀是壓力不穩(wěn)定引起的,引起壓力不穩(wěn)一般是因為有氣泡在泵里,調節(jié)流動相比例的時候看看一點一點調,從乙腈百分之百,百分之三到百分之五的比例一點點的加到想要的比例,這樣不會常熟氣泡;是不是磷酸水溶液和乙腈混合的過程中產生了氣泡呢;如果不是,改變磷酸溶液濃度試試看。
17樓2012-03-26 13:01:46
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匿名

用戶注銷 (正式寫手)



小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包,謝謝回帖
本帖僅樓主可見
18樓2012-03-26 17:21:21
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