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wuhuiwolf新蟲 (初入文壇)
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[求助]
梯度洗脫，出現(xiàn)平頭鬼峰（SDS）
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液相條件：agilent 二元泵，梯度洗脫，其中緩沖液配制方法如下： 緩沖液＝（7.8g NaH2PO4+4ml 三乙胺+1.2g 十二烷基硫酸鈉，加水至1000ml，調(diào)pH3.0）/乙腈（90/10） 乙腈： 緩沖液 0min 28 72 5min 28 72 45min 58 42 50min 28 72 60min 28 72 該條件下，在約30.5min出現(xiàn)鬼峰，且一直出現(xiàn)（進(jìn)空白溶劑、樣品等均出現(xiàn)），如圖，波長260nm，流速：1.0ml/min，柱溫35攝氏度，色譜柱：C18 5 um 250×4.6mm。 最開始使用此機(jī)器和色譜柱時(shí)，并未出現(xiàn)如此情況。隨后出現(xiàn)了鬼峰。懷疑系統(tǒng)污染，因此采用異丙醇，0.2ml/min沖洗系統(tǒng)（未接色譜柱）過夜，并不斷進(jìn)樣異丙醇，第二天更換成進(jìn)樣系統(tǒng)，仍然出現(xiàn)相同的鬼峰。采用10%乙腈沖洗系統(tǒng)（連接色譜柱，0.2ml/min），沖洗48h（一個(gè)周末，并未進(jìn)樣），周一后更換成進(jìn)樣系統(tǒng)，仍然出現(xiàn)相同的鬼峰。 換機(jī)器waters 、換一根色譜柱同樣出現(xiàn)相同問題，重新配制流動(dòng)相，也出現(xiàn)相同問題。以水重復(fù)進(jìn)樣，均出現(xiàn)相同情況，且峰面積大小不變。請問解決方法。 [ Last edited by wuhuiwolf on 2012-3-18 at 15:02 ] |
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6樓2012-03-19 12:39:19
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