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[交流]
【交流】實驗操作 小trick 已有3人參與
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請各位談談你們在實驗中所發(fā)現(xiàn)的或?qū)嶒炇伊鱾鞯?實驗技巧！��！ 或者個人的實驗經(jīng)驗或是認為很實用的方法！ 我先來說說：僅是一家之言，拋磚引玉，大家別見笑！也可能說的不對，僅代表我的觀點。 1、膠回收后PCR： 那時候碩士時的老板不是很有錢，小提質(zhì)粒都是自己配的試劑，所以膠回收也買的少。有次晚上做實驗要膠回收然后PCR，發(fā)現(xiàn)沒有盒子了，又不好老借別的實驗室的。很郁悶，師兄推薦一方法很受用： 將膠切下來，凍-20，確保凍透了，取出用封口膜包住膠，用力擠壓，就會有液體流出，然后吸取液體。稀釋10-100倍，取1微升進行PCR，效果還是不錯的。 2、做southern，測端粒長度： 標探針是用的是P32，因為量�。ㄔ倭看笠膊粫芏啵瑯送旰笠恋黼x心回收探針（和回收核酸的過程一樣，就是無水乙醇沉淀那個），肉眼根本看不到，但還是想看看，要不一部小心到了，那就麻煩了。 也是師兄了：說加入糖原就能夠看到探針，果然是那樣的，離心后有一個小白點，挺明顯的。 可惜糖原的制備方法，我給搞丟了。。。。。。。 3、病毒包裝 挺麻煩的，涉及的太多，只說鋪細胞部分 現(xiàn)在我知道的有幾種方法：A 加入細胞后晃前后左右的晃然后突然停！（我們實驗室有的人用的較好） B 加入細胞后玩命的吹打，將細胞打散！（我們實驗室有的人用的較好） C事先用培養(yǎng)基潤板子，然后均勻加入細胞（曾今用過，但比D稍差點） D充分消化好細胞，將細胞直接加入空板，稍晃下鋪滿地面，如鋪滿了不晃也可以的（我做這個比較受用） 4感染病毒 無論貼壁的還是懸浮的，我都1800轉(zhuǎn)，1.5小時室溫離心，感染效率是會高些的。 5爬組織細胞： 最早是剪了組織，然后貼在鋪了血清的平皿里2h，差不多貼牢點后加入少量的培養(yǎng)基（不能沒過組織塊），放培養(yǎng)箱里培養(yǎng)讓他爬細胞。但發(fā)現(xiàn)不太好，組織塊易飄。 還是剪碎組織后再用酶消化，然后鋪細胞瓶里培養(yǎng)較好。細胞收得多。 [ Last edited by telomerase on 2012-3-19 at 10:21 ] |
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3樓2012-03-20 20:46:32
gaoyang636
木蟲 (著名寫手)
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5樓2012-06-02 14:55:53
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