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若然飛翔新蟲 (初入文壇)
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[求助]
利用CHO進(jìn)行分泌表達(dá)
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| Sample Text 我想利用CHO細(xì)胞分泌表達(dá)一個(gè)膜蛋白，從上游構(gòu)建開始，我該如何選擇可以在CHO中進(jìn)行高效表達(dá)的載體?如果使用pCDNA3.1,啟動(dòng)子，增強(qiáng)子我該如何處理？如何選擇信號(hào)肽�。縿傞_始接觸，有太多不明白的地方了，請(qǐng)大家?guī)蛶兔?img src="https://muchongimg.xmcimg.com/data/emuch_bbs_images/smilies/dragon/19.gif" align="absmiddle" border="0"> |
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若然飛翔
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4樓2012-03-21 08:01:57
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首先，完整的膜蛋白是不可能分泌表達(dá)的（你是指將膜蛋白表達(dá)在CHO細(xì)胞的細(xì)胞膜上吧？）。既然是膜蛋白，就用它自身的信號(hào)肽就好了。 表達(dá)時(shí)載體的確很重要，但也得分情況的: 如果你是想構(gòu)建穩(wěn)定的細(xì)胞株，那么你可以考慮用pcDNA3.1，也可以考慮用invitrogen的FlP-IN系統(tǒng)，更容易獲得高表達(dá)細(xì)胞株； 如果是做瞬時(shí)表達(dá)，那么建議你用invitrogen的MembranePro™ Functional Protein Expression (FPE) System。 |
2樓2012-03-19 21:36:01
若然飛翔
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3樓2012-03-20 08:41:10
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6樓2012-03-21 13:37:23
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