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decloud木蟲 (著名寫手)
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[求助]
如何插入40bp的小片段 已有1人參與
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分子牛人多,繼續(xù)搬問題 大家貌似對(duì)大片斷都很熟悉,我來個(gè)小的... 我要在一個(gè)外源基因(900bp)的片段后面插入一段40bp左右的linker(有方向要求),,有沒有高招.怎么樣在不動(dòng)這個(gè)外源基因(其3'端末端是ApaI, 并且就這么一個(gè))的情況下,插入小片段. |
分子問題及解決方案匯總 |

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設(shè)計(jì)引物時(shí)overlap的區(qū)域有15bp即可。 1.900下游設(shè)計(jì)引物,包括15bplinker前面的序列; 2.設(shè)計(jì)linker上游引物,包括900后面的15bp; 3.用900上下游引物擴(kuò)增;同時(shí)擴(kuò)linker,或者合成; 4.再將產(chǎn)物混合摩爾比1:1做模板,用900上游和linker下游引物擴(kuò)增,將他們串聯(lián)起來。 |

金蟲 (正式寫手)
琴美喜歡發(fā)呆 不喜歡發(fā)脾氣

木蟲 (小有名氣)
至尊木蟲 (著名寫手)
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