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曉惜凝香

新蟲(chóng) (初入文壇)

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[交流] sds-page蛋白樣變性后仍會(huì)降解？

SDS-PAGE的蛋白加loadingbuffer煮沸變性后需要-20度保存，我不太明白已經(jīng)變性了室溫為什么還會(huì)降解？蛋白酶煮沸的時(shí)候不也降解了么？

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1樓 2012-03-28 16:24:57

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xiezhenrong

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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做過(guò)前面一次變性蛋白質(zhì)電泳上樣沒(méi)上完的常溫放置過(guò)幾天再跑沒(méi)發(fā)現(xiàn)降解

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回復(fù)此樓

9樓2012-03-30 20:04:22

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顏英

銅蟲(chóng) (小有名氣)

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無(wú)論變性不變性，他都是大分子有機(jī)物，有時(shí)微生物生長(zhǎng)的良好載體

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2樓2012-03-28 18:32:56

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lzgxgz

至尊木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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個(gè)人以為一個(gè)讓蛋白變性并煮沸的環(huán)境不會(huì)是微生物污染。
以前在書(shū)上看到，加熱煮沸是加快sds與蛋白結(jié)合，常溫放置過(guò)夜還是多少小時(shí)也達(dá)到同樣結(jié)果。按理常溫放置不會(huì)降解蛋白。
但在實(shí)驗(yàn)中，我煮沸并常溫放置過(guò)，只是電泳效果不好，沒(méi)發(fā)現(xiàn)有降解現(xiàn)象。

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3樓2012-03-29 06:23:08

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ggynzb

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SDS和蛋白樣品結(jié)合夠市蛋白質(zhì)變性，一般是不會(huì)降解的，樓主檢查一下是不是操作步驟出了什么錯(cuò)誤導(dǎo)致結(jié)果不好呢。

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4樓2012-03-29 07:39:50

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