 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1618 | 回復(fù): 6 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
dingfang0707金蟲 (正式寫手)
|
[求助]
前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)
|
|
|
我最近在體外培養(yǎng)鴨前體脂肪細(xì)胞，但每次看到的細(xì)胞量都非常少，即使傳代后也是零零散散那么幾個細(xì)胞，少得可憐。請高手指點一下。謝謝 PS：每次取樣：孵化后1周齡的小鴨子5只左右，腿部、腹部脂肪細(xì)胞。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有249人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
留學(xué)--博士招生
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
化學(xué)工程，本211，求調(diào)劑，ab區(qū)不限
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
邵陽學(xué)院食品與化學(xué)工程學(xué)院碩士調(diào)劑
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
湖北師范大學(xué)招調(diào)劑啦
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 關(guān)于構(gòu)建細(xì)胞實驗室的細(xì)節(jié)問題
已經(jīng)有35人回復(fù)
- 從原代開始培養(yǎng)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞會不會隨著培養(yǎng)時間的延長而開始分化？
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 霉菌中形成的脂肪酶是胞內(nèi)酶 還是胞外酶？
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 【求助/交流】細(xì)菌細(xì)胞膜脂肪酸
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】有關(guān)脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【轉(zhuǎn)帖】新方法可預(yù)測干細(xì)胞分化過程
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】微生物能自身代謝出脂肪酸嗎？
已經(jīng)有6人回復(fù)
完美紫蝶
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 6.8
- 帖子: 23
- 在線: 50.4小時
- 蟲號: 2388820
- 注冊: 2013-03-30
- 專業(yè): 細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
7樓2013-03-30 17:37:42
★ ★ ★
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵，很熱心哦 2012-04-09 14:22:52
小丹木木: 金幣+3, 鼓勵，很熱心哦 2012-04-09 14:22:52
|
感興趣，查了下，結(jié)果是小鼠的，僅供參考： 正常小鼠前脂肪細(xì)胞的培養(yǎng) 實驗材料： 1. 細(xì)胞來源：8—12天齡的小鼠； 2. 清洗液：不含Ca2+和Mg2+的1&time，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素，pH7.4； 3. 消化液：0.3%膠原酶溶液，含4%牛血清 白蛋白。用Hanks液配制； 4. DW培養(yǎng)液：DMEM和WAJC404培養(yǎng)液按1：1（V/V）混合，添加100IU/ml青霉素、50μg/ml鏈霉素； 5. 培養(yǎng)液a：DW培養(yǎng)液，10%胎牛血清 ； 6. 培養(yǎng)液b：DW培養(yǎng)液，補充胰島素10μg/ml、轉(zhuǎn)鐵蛋白10μg/ml、成纖維細(xì)胞生長因子 （FGF）10ng/ml和高密度脂蛋白（HDL）溶液5μl/ml； 7. 高密度脂蛋白（HDL）溶液：含蛋白質(zhì)18mg/ml和膽固醇10mg/ml； 8. 地塞米松：工作濃度為10-7mol/L； 9. 篩網(wǎng)：孔徑分別為250μm與80μm的尼龍網(wǎng)篩； 實驗方法： 1. 取材； 1） 取8—12天齡的小鼠，窒息處死后，置于冰塊上； 2） 在無菌條件下迅速切取腹股溝的脂肪墊，放入液中； 3） 清除脂肪墊中的大血管和結(jié)締組織，洗凈血污。稱取脂肪墊的重量； 2. 分離細(xì)胞； 1） 將脂肪墊剪成1mm3左右的小塊，轉(zhuǎn)入50ml錐形離心管 中； 2） 每0.1g組織塊加入3—4ml消化液。在37℃水浴 搖床 上以60r/min的轉(zhuǎn)速輕微振蕩，消化1h。其間每隔10min取出離心管 ，搖動，使組織塊與消化液充分混勻； 3） 消化完后，用吸管 反復(fù)吹打消化液，分散組織塊，制成細(xì)胞懸液； 4） 用孔徑為250μm的尼龍網(wǎng)篩過濾細(xì)胞懸液，除去未分散的組織塊，收集濾液。將濾過液再用孔徑為80μm的尼龍網(wǎng)篩過濾，除去大部分成熟脂肪細(xì)胞，收集濾液； 5） 將最后得到的濾液離心（700g，7—10min）。吸棄漂浮的脂肪細(xì)胞和消化液； 6） 用培養(yǎng)液a清洗細(xì)胞，離心（700g，7min）。將細(xì)胞團(tuán)制成懸液，再離心。最后，將細(xì)胞沉淀用培養(yǎng)液a重新制成細(xì)胞懸液； 3. 原代培養(yǎng)； 1） 用培養(yǎng)液a調(diào)節(jié)細(xì)胞密度。將細(xì)胞以1.5&time104個/cm2的密度接種于培養(yǎng)板中； 2） 24h后，用DW培養(yǎng)液徹底清洗細(xì)胞，除去培養(yǎng)物中殘留的胎牛血清和未貼壁的細(xì)胞（主要為紅細(xì)胞）； 3） 換入培養(yǎng)液b，在37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。以后用培養(yǎng)液b維持培養(yǎng)。每3d換液一次； 4） 在細(xì)胞匯合成片后，繼續(xù)培養(yǎng)；或于細(xì)胞匯合成片后第五天，在培養(yǎng)液b中加入10-7mol/L地塞米松，繼續(xù)培養(yǎng)； 5） 培養(yǎng)至出現(xiàn)漂浮細(xì)胞時，即可收貨細(xì)胞，進(jìn)行鑒定 |
3樓2012-04-09 10:29:31
4樓2012-04-09 10:31:01
dingfang0707
金蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 5 (幼兒園)
- 金幣: 1570.1
- 散金: 499
- 紅花: 2
- 帖子: 507
- 在線: 208.3小時
- 蟲號: 1177271
- 注冊: 2010-12-25
- 性別: MM
- 專業(yè): 細(xì)胞增殖、生長與分化
5樓2012-04-10 08:49:52
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 08工科，295，接受跨專業(yè)調(diào)劑 +3 | lmnlzy 2026-03-31 | 3/150 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0703化學(xué) +19 | 妮妮ninicgb 2026-03-27 | 19/950 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +4 | 圖鑒212 2026-03-30 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 276求調(diào)劑 +3 | 趙久華 2026-03-29 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
 物理學(xué)調(diào)劑
+3
|
小羊36 2026-03-30 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +8 | 墨墨漠 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿鄭大材料工程290求調(diào)劑 +12 | Youth_ 2026-03-30 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 288資源與環(huán)境專碩求調(diào)劑，不限專業(yè)，有學(xué)上就行 +11 | lllllos 2026-03-30 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 一志愿中海洋材料357 +3 | 麥恩莉. 2026-03-30 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿：西北大學(xué)，英一數(shù)一408-284分求調(diào)劑 +5 | 12.27 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 309求調(diào)劑 +15 | 誰不是少年 2026-03-29 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)/290求調(diào)劑/本科經(jīng)歷豐富/工科也可 +13 | 丹青奶蓋 2026-03-26 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 材料與化工272求調(diào)劑 +21 | 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 | 21/1050 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +10 | 鈕恩雪 2026-03-25 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 085600，專業(yè)課化工原理，321分求調(diào)劑 +5 | 大饞小子 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +7 | 璞玉~~ 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 340求調(diào)劑 +5 | jhx777 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿上海理工能源動力（085800）310分求調(diào)劑 +3 | zhangmingc 2026-03-27 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑，一志愿南農(nóng)083200食品科學(xué)與工程 +5 | XQTJZ 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 314求調(diào)劑 +3 | 溪云珂 2026-03-26 | 3/150 |
|