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精油抑菌試驗MIC怎么測定啊？求高手指點
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我現(xiàn)在在做精油對大腸桿菌的抑菌試驗，由于精油是油性的，易揮發(fā)，我嘗試用吐溫-80乳化后稀釋和石油醚兩種不同方法稀釋，然后用濾紙片法和杯碟法對最小抑菌濃度（MIC）進行測定，重復了很多次可是試驗結(jié)果都不理想，請大家?guī)兔Ψ治鲆幌略颍?br />
①濾紙片法做出來的抑菌圈奇形怪狀的，大小沒有規(guī)律，邊緣不整齊。有時候抑菌圈內(nèi)還會均勻的長一些單菌落。抑菌圈的大小也不是和精油的濃度成正比，有的濃度小的抑菌圈反而大。（我是將6mm濾紙片泡在精油不同的稀釋液中幾分鐘，然后將紙片在精油溶液的瓶口稍微瀝干溶液，然后貼在涂布好菌液的培養(yǎng)平板上，剛貼上的時候濾紙片的周圍精油擴散到很好，形狀很圓，可是培養(yǎng)完成后的抑菌圈會變成不同的形狀，愁啊，不知道怎么回事） ②而杯碟法不知道為什么都沒有抑菌圈，我是按照微生物實驗指導書中的操作步驟做的，先倒一層無菌培養(yǎng)基然后一層含大腸桿菌的培養(yǎng)基，牛津杯中加入200微升的精油稀釋液。培養(yǎng)后菌層長的還不錯，就是所有的濃度都沒有抑菌圈。 請各位高手指點迷津啊，我不知道錯在哪里了？做抑菌試驗有其他的好方法嗎？ |
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★ ★ ★ ★ ★ ★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
坤坤june: 金幣+5 2012-04-09 12:16:20
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
坤坤june: 金幣+5 2012-04-09 12:16:20
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這個實驗以前做過抑菌先談下自己實驗的經(jīng)驗 1.MIC不光與你要做的物質(zhì)特性有關，還與很多東西有關，比如重要的，你的指示菌的濃度，瓊脂的含量 2.操作過程要在滅過菌的超凈臺進行，你剛開始說的那個濾紙片長菌，估計是沒控制好過程中染菌的可能，你那樣浸泡就拿出來，精油中都可能有菌。以前我們是把濾紙片什么的滅好菌，放在瓊脂上，然后用0.22的膜過濾一定量的試劑滴在濾紙片上，你說的抑菌圈不規(guī)則可能于濾紙片不圓或者平板瓊脂沒倒好有關，或者你說的濾紙長菌肯定會影響抑菌圈的形狀 3.這種方法適合測MIC嗎？MIC是最小抑菌濃度吧，抑菌圈多大算是最小抑菌濃度？建議用測OD吸光度做這個實驗 4.剛剛看了上面的回復，對精油的特性不太了解，可能實驗還有別的注意的地方 [ Last edited by xzx018 on 2012-4-9 at 10:00 ] |
4樓2012-04-09 09:57:25
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