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精油抑菌試驗MIC怎么測定啊?求高手指點
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我現(xiàn)在在做精油對大腸桿菌的抑菌試驗,由于精油是油性的,易揮發(fā),我嘗試用吐溫-80乳化后稀釋和石油醚兩種不同方法稀釋,然后用濾紙片法和杯碟法對最小抑菌濃度(MIC)進行測定,重復(fù)了很多次可是試驗結(jié)果都不理想,請大家?guī)兔Ψ治鲆幌略颍?br />
①濾紙片法做出來的抑菌圈奇形怪狀的,大小沒有規(guī)律,邊緣不整齊。有時候抑菌圈內(nèi)還會均勻的長一些單菌落。抑菌圈的大小也不是和精油的濃度成正比,有的濃度小的抑菌圈反而大。(我是將6mm濾紙片泡在精油不同的稀釋液中幾分鐘,然后將紙片在精油溶液的瓶口稍微瀝干溶液,然后貼在涂布好菌液的培養(yǎng)平板上,剛貼上的時候濾紙片的周圍精油擴散到很好,形狀很圓,可是培養(yǎng)完成后的抑菌圈會變成不同的形狀,愁啊,不知道怎么回事) ②而杯碟法不知道為什么都沒有抑菌圈,我是按照微生物實驗指導(dǎo)書中的操作步驟做的,先倒一層無菌培養(yǎng)基然后一層含大腸桿菌的培養(yǎng)基,牛津杯中加入200微升的精油稀釋液。培養(yǎng)后菌層長的還不錯,就是所有的濃度都沒有抑菌圈。 請各位高手指點迷津啊,我不知道錯在哪里了?做抑菌試驗有其他的好方法嗎? |
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這個實驗以前做過抑菌先談下自己實驗的經(jīng)驗 1.MIC不光與你要做的物質(zhì)特性有關(guān),還與很多東西有關(guān),比如重要的,你的指示菌的濃度,瓊脂的含量 2.操作過程要在滅過菌的超凈臺進行,你剛開始說的那個濾紙片長菌,估計是沒控制好過程中染菌的可能,你那樣浸泡就拿出來,精油中都可能有菌。以前我們是把濾紙片什么的滅好菌,放在瓊脂上,然后用0.22的膜過濾一定量的試劑滴在濾紙片上,你說的抑菌圈不規(guī)則可能于濾紙片不圓或者平板瓊脂沒倒好有關(guān),或者你說的濾紙長菌肯定會影響抑菌圈的形狀 3.這種方法適合測MIC嗎?MIC是最小抑菌濃度吧,抑菌圈多大算是最小抑菌濃度?建議用測OD吸光度做這個實驗 4.剛剛看了上面的回復(fù),對精油的特性不太了解,可能實驗還有別的注意的地方 [ Last edited by xzx018 on 2012-4-9 at 10:00 ] |
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