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精油抑菌試驗(yàn)MIC怎么測(cè)定��？求高手指點(diǎn)
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我現(xiàn)在在做精油對(duì)大腸桿菌的抑菌試驗(yàn)，由于精油是油性的，易揮發(fā)，我嘗試用吐溫-80乳化后稀釋和石油醚兩種不同方法稀釋，然后用濾紙片法和杯碟法對(duì)最小抑菌濃度（MIC）進(jìn)行測(cè)定，重復(fù)了很多次可是試驗(yàn)結(jié)果都不理想，請(qǐng)大家?guī)兔Ψ治鲆幌略颍?br />
①濾紙片法做出來的抑菌圈奇形怪狀的，大小沒有規(guī)律，邊緣不整齊。有時(shí)候抑菌圈內(nèi)還會(huì)均勻的長(zhǎng)一些單菌落。抑菌圈的大小也不是和精油的濃度成正比，有的濃度小的抑菌圈反而大。（我是將6mm濾紙片泡在精油不同的稀釋液中幾分鐘，然后將紙片在精油溶液的瓶口稍微瀝干溶液，然后貼在涂布好菌液的培養(yǎng)平板上，剛貼上的時(shí)候?yàn)V紙片的周圍精油擴(kuò)散到很好，形狀很圓，可是培養(yǎng)完成后的抑菌圈會(huì)變成不同的形狀，愁啊，不知道怎么回事） ②而杯碟法不知道為什么都沒有抑菌圈，我是按照微生物實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書中的操作步驟做的，先倒一層無菌培養(yǎng)基然后一層含大腸桿菌的培養(yǎng)基，牛津杯中加入200微升的精油稀釋液。培養(yǎng)后菌層長(zhǎng)的還不錯(cuò)，就是所有的濃度都沒有抑菌圈。 請(qǐng)各位高手指點(diǎn)迷津啊，我不知道錯(cuò)在哪里了？做抑菌試驗(yàn)有其他的好方法嗎？ |
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小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
坤坤june: 金幣+5 2012-04-09 12:16:20
小木蟲: 金幣+0.5, 給個(gè)紅包，謝謝回帖
坤坤june: 金幣+5 2012-04-09 12:16:20
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這個(gè)實(shí)驗(yàn)以前做過抑菌先談下自己實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn) 1.MIC不光與你要做的物質(zhì)特性有關(guān)，還與很多東西有關(guān)，比如重要的，你的指示菌的濃度，瓊脂的含量 2.操作過程要在滅過菌的超凈臺(tái)進(jìn)行，你剛開始說的那個(gè)濾紙片長(zhǎng)菌，估計(jì)是沒控制好過程中染菌的可能，你那樣浸泡就拿出來，精油中都可能有菌。以前我們是把濾紙片什么的滅好菌，放在瓊脂上，然后用0.22的膜過濾一定量的試劑滴在濾紙片上，你說的抑菌圈不規(guī)則可能于濾紙片不圓或者平板瓊脂沒倒好有關(guān)，或者你說的濾紙長(zhǎng)菌肯定會(huì)影響抑菌圈的形狀 3.這種方法適合測(cè)MIC嗎？MIC是最小抑菌濃度吧，抑菌圈多大算是最小抑菌濃度？建議用測(cè)OD吸光度做這個(gè)實(shí)驗(yàn) 4.剛剛看了上面的回復(fù)，對(duì)精油的特性不太了解，可能實(shí)驗(yàn)還有別的注意的地方 [ Last edited by xzx018 on 2012-4-9 at 10:00 ] |
4樓2012-04-09 09:57:25
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