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MR_wang金蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
枯草芽孢桿菌中試染菌
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做枯草芽孢桿菌中試,小試已驗(yàn)證沒(méi)有問(wèn)題,10L發(fā)酵罐芽孢120億左右,2000L中試總是染菌,菌落形態(tài)明顯不同,每次都在10時(shí)開(kāi)始出現(xiàn)雜菌,12h以后全是雜菌,顯微鏡看細(xì)菌很長(zhǎng),比正?莶菀L(zhǎng)5倍以上,16s無(wú)法鑒定,且能形成芽孢,發(fā)酵罐更換空氣濾芯無(wú)效,使用的是四氟乙烯材質(zhì)的濾芯,發(fā)酵罐使用時(shí)間接近十年,現(xiàn)在懷疑是發(fā)酵罐或空氣系統(tǒng)問(wèn)題,請(qǐng)高人指點(diǎn)解決染菌問(wèn)題! [ Last edited by MR_wang on 2012-4-9 at 22:08 ] |

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1確定你說(shuō)的雜菌是否是枯草的一種形態(tài)。因?yàn)樽鲞^(guò)的大腸桿菌形態(tài)也有非常長(zhǎng)的類似絲狀,但仍然是大腸。 2如果確定是雜菌,檢查罐體是否有密封不嚴(yán)之處,多注意死角處;如果懷疑通氣系統(tǒng),多加一級(jí)過(guò)濾裝置嘗試下。 3種子罐接種菌密度適當(dāng)提高,高密度的種子也許會(huì)有優(yōu)勢(shì)。 4注意補(bǔ)料罐或者補(bǔ)料桶和補(bǔ)料管道閥門是否有不嚴(yán)的地方。 |

木蟲(chóng) (小有名氣)
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1.根據(jù)你描述的現(xiàn)象,感覺(jué)應(yīng)該是培養(yǎng)基滅菌不徹底造成的染菌,提高滅菌溫度或延長(zhǎng)滅菌時(shí)間不知道對(duì)你的培養(yǎng)基成分是否有破壞。你的培養(yǎng)基中是否有玉米漿(或玉米漿干粉)、玉米面等一類的成分,如果有的話就得提高滅菌溫度或延長(zhǎng)滅菌時(shí)間,或者把玉米漿提前滅菌然后再和其它的培養(yǎng)基成分一起滅菌。 2.10L罐與中試罐的結(jié)構(gòu)也有一定的差異,上罐前仔細(xì)檢查罐內(nèi)是否有死角,是否有積垢的地方,罐內(nèi)是清理干凈,如果連續(xù)污染在上罐前要用2%的液堿85~100度煮罐30~60min,還要空消。 3.培養(yǎng)基滅菌的時(shí)候與培養(yǎng)基接觸的管道是否都有進(jìn)蒸汽,如進(jìn)氣管、取樣管、罐底出料管等,這些地方滅菌不到位也是一個(gè)染菌源。 僅提供簡(jiǎn)單的建議,希望對(duì)你有幫助,祝你成功。 |
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