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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 綜合其他 » 枯草芽孢桿菌中試染菌
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MR_wang金蟲 (小有名氣)
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[求助]
枯草芽孢桿菌中試染菌
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做枯草芽孢桿菌中試，小試已驗證沒有問題，10L發(fā)酵罐芽孢120億左右，2000L中試總是染菌，菌落形態(tài)明顯不同，每次都在10時開始出現(xiàn)雜菌，12h以后全是雜菌，顯微鏡看細菌很長，比正�？莶菀L5倍以上，16s無法鑒定，且能形成芽孢，發(fā)酵罐更換空氣濾芯無效，使用的是四氟乙烯材質的濾芯，發(fā)酵罐使用時間接近十年，現(xiàn)在懷疑是發(fā)酵罐或空氣系統(tǒng)問題，請高人指點解決染菌問題！ [ Last edited by MR_wang on 2012-4-9 at 22:08 ] |
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2樓2012-04-10 09:38:13
wgy2007
木蟲 (小有名氣)
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【答案】應助回帖
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MR_wang: 金幣+3, ★有幫助, 感謝 2012-04-12 20:20:28
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1.根據(jù)你描述的現(xiàn)象，感覺應該是培養(yǎng)基滅菌不徹底造成的染菌，提高滅菌溫度或延長滅菌時間不知道對你的培養(yǎng)基成分是否有破壞。你的培養(yǎng)基中是否有玉米漿（或玉米漿干粉）、玉米面等一類的成分，如果有的話就得提高滅菌溫度或延長滅菌時間，或者把玉米漿提前滅菌然后再和其它的培養(yǎng)基成分一起滅菌。 2.10L罐與中試罐的結構也有一定的差異，上罐前仔細檢查罐內(nèi)是否有死角，是否有積垢的地方，罐內(nèi)是清理干凈，如果連續(xù)污染在上罐前要用2％的液堿85～100度煮罐30～60min，還要空消。 3.培養(yǎng)基滅菌的時候與培養(yǎng)基接觸的管道是否都有進蒸汽，如進氣管、取樣管、罐底出料管等，這些地方滅菌不到位也是一個染菌源。 僅提供簡單的建議，希望對你有幫助，祝你成功。 |
3樓2012-04-10 10:00:47
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